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无菌芦苇的培育

来源：小侦探旅游网

无菌芦苇的培育

1.试剂和器皿

①70%乙醇；②5%的次氯酸钠溶液；③灭菌的去离子水（约5000ml）；④Hoagland solution 植物培养液；⑤平板；⑥5ml头；⑦150ml三角瓶；⑧300ml三角瓶；试剂配制：

Ⅰ.70%乙醇： 70%乙醇用无水乙醇配制，配制用水用灭菌的去离子水，配制后装于洗净灭菌的瓶子中。

Ⅱ.5%的次氯酸钠溶液：用灭菌的去离子水配制后装于洗净灭菌的瓶子中（如果有无菌滤膜，可以用无菌滤膜过滤后再用，没有就直接用）；取5ml Naclo溶液加入95ml ddH2O。

Ⅲ.Hoagland solution 植物培养液：

Hoagland solution 植物培养液配方

Substance KNO3 NaH2PO4 K2SO4 MgSO4·7H2O CaCl2·2H2O FeSO4·7H2O H3BO3 MnCl2·4H2O CuSO4·5H2O ZnSO4·7H2O H2MoO4·4H2O pH mg/L 36.1 3.87 298 103 147 3.33 0.95 0.39 0.03 0.08 0.2 7 Ⅳ.0.25%结冷胶HS固体培养基：100ml营养液中加入0.25g结冷胶。 2.操作方法：

⑴首先将芦苇种子用70%乙醇消毒1min。 ⑵用5%的次氯酸钠消毒5min。

⑶用ddH2O冲洗三次后于含有0.25%结冷胶的HS固体培养基上进行黑暗培养。 ⑷当芦苇种子发芽后，将小苗移到新的HS固体培养基上置于28℃光照培养箱中光照培养24h。

⑸之后将小苗移入200ml HS液体培养基中置于光照培养箱中28℃，10,000 lux，16-h day/8-h night培养两周。每隔两周换一次培养基。

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