浙江中医药大学实验报告
日期:2011-11 地点:机能学实验室15109
氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用观察
【摘要】1.目的:①复制家兔急性肝功能不全模型,用十二指肠灌注复方氯化铵法,观察氨中毒对家兔脑功能影响;②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病,探讨其治疗机制。2.方法:全班分为五大组,其中第一组为肝叶不结扎型,第二组为肝叶结扎,也做手术,但不注射氯化铵。第三组为发病后不治疗,其余小组为症状明显抢救组。本小组做了第一组。3.结果:复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响,而肝可解氨中毒,复方谷氨酸钠也可缓解其作用。4.结论:肝具有解毒作用,肝功能不全在肝性脑病的发生中占极大地作用。
【关键词】氨中毒 肝性脑病 复方谷氨酸钠
【 Abstract 】 1. Purpose: (1) copy of acute liver not whole model, with duodenal perfusion
compound ammonium chloride method, observation ammonia poisoning brain function of rabbit influence; (2) with the ear margin intravenous sodium glutamate treatments for hepatic encephalopathy, discussed the mechanism of treatment. 2. Methods: the whole class is divided into five groups, among which the first group for model group, the second group for the treatment group, and the third for JiaShouShu group, the fourth group for symptoms first-aid group, to prevent the fifth group. 3. The result: compound ammonium chloride can make the rabbit affected by brain function, and liver for ammonia poisoning, compound sodium glutamate also can alleviate its role. 4. Conclusion: liver with
detoxification role, liver function is all in the occurrence of hepatic encephalopathy up greatly effect.
【 Key Words 】 ammonia poisoning hepatic encephalopathy compound glutamic acid sodium
1实验材料
1.1对象:家兔(2.7kg);
1.2实验试剂:氨基甲酸乙酯,复方氯化铵溶液,复方谷氨酸钠溶液;
1.3实验仪器:10ml注射器、50ml注射器及针头,手术剪,镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管;
2实验方法
2.1实验分组 本组实验为第一小组
2.2麻醉 家兔称重,按5ml/kg剂量由耳缘静脉注射13.5ml氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。
2.3急性肝功能不全动物模型复制
从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口,打开腹腔;暴露肝脏,向下压肝脏,剪断肝与横膈之间的镰状韧带,使肝叶游离,辨明肝脏各叶,用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周,不结扎肝脏。 找出十二指肠,找其上壁血管较少的一处做一环形缝合,在环形中间剪一个小口,沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm,切口荷包缝合固定导管,用止血钳关闭腹腔切口。 2.4实验观察
2.4.1观察并记录兔一般情况,呼吸(频率、幅度),角膜反射、对刺激的反应等指标。然后试剂注射 前两次分别向十二指肠内注入10ml的复方氯化铵溶液,之后的注射量都为5ml每次注射间隔5min,直至全身性抽搐、角弓反张为止,仔细观察并记录所用的复方氯化铵溶液。 2.4.2 治疗
按20ml/kg体重剂量自耳缘静脉缓慢注入25g/L复方谷氨酸钠溶液,并按5ml/kg体重剂量向十二指肠注入10g/L醋酸进行治疗处理,观察症状有无缓解。
3实验结果
3.1实验结果数据记录 呼吸幅度 呼吸频率(/min) 角膜反射 对刺激的反应 实验前 较缓 55 1注入10ml 较缓 52 2注入10ml 减缓 55 3注入10ml 缓 57 有 没有 4注入5ml 缓 61 5注入5ml 缓 从以上实验数据及现场实验,兔子出现全身紫绀现象,最后也没有出现全身抽搐现象。说明本实验最后失败。主要原因可能为注入麻药后,兔子的代谢产物因全身肌肉活动的减缓而逐渐堆积,到最后堵塞了气管及血管,从而出现紫绀现象。
现从其他小组获得数据并对结果进行讨论 4小组讨论
4.1假手术的目的:假手术组与模型组的不同点是其肝叶健全,即肝功能健全。主要用于对比证明肝对氨有解毒作用,肝功能不全的家兔对氨的解毒作用明显低于肝功能健全的家兔,说明肝有解氨中毒的作用。 4.2复方氯化铵溶液对肝性脑病的作用机理,肝大部分结扎在实验中的作用:
4.2.1据氨中毒学说,正常情况下,血氨的来源于清除保持动态平衡,而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。在结扎大部分肝的基础上灌注氯化铵导致血氨增高,增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织,通过干扰脑组织的能量代谢,使脑内神经递质发生改变,引起脑的功能障碍,出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状。
4.2.2肝大部分结扎术在实验性肝性脑病中的作用:采用家兔大部分肝结扎,是为了复制急性肝功能不全的动物模型,造成肝解毒功能急剧降低,在此基础上经十二指肠灌入复方氯化铵溶液,导致肠道中氨生成增多并吸收入血。
4.3家兔呼吸频率和肌紧张的改变
4.3.1家兔呼吸频率的改变:由实验数据可以看出,给药后家兔的呼吸频率是加快的,可以猜测家兔呼吸频率的增加是由于氨中毒引起的。
4.3.2随着实验的进行家兔的肌紧张加剧,以至于出现抽搐甚至角弓反张等表现。
4.3.3说明:血氨浓度升高,干扰脑组织的能量代谢,主要是干扰葡萄糖的生物氮化过程,而脑组织随时都要依赖血液中的葡萄糖提供能量。氨与脑内的α-酮戊二酸结合,生成谷氨酸,影响糖代谢,使ATP产生不足,产生谷氨酰胺为抑制神经的递质,并使脑内兴奋性神经递质减少,并且氨对神经细胞膜也有抑制作用是神经细胞兴奋性异常,并干扰神经传导活动。其中乙酰胆碱有扩张血管减慢心率的作用,从而可见家兔呼吸频率加快的原因。而其中肌紧张加剧可能由于脑组织中氨大量增加使大量谷氨酸转化成谷氨酰胺使氨中毒早期生成γ-氨基丁酸的底物-谷氨酸减少,引起脑内抑制性递质γ-氨基丁酸减少有关。 4.4复方谷氨酸钠溶液的影响和作用机理:
4.4.1注射复方谷氨酸钠溶液后可以缓解家兔氨中毒的症状,且治疗组的效果最好,作为预防则其效果不大。
4.4.2作用机理:谷氨酸可与血中过多的氨结合成为无毒的谷酰胺,由尿排出,进而降低血氨。谷氨酸还可参与脑细胞的代谢,改善中枢神经系统的功能。
5结论
结扎肝脏后,注射氯化铵溶液,使血氨升高而引起肝性脑病;肝脏对氨具有清除作用,所以不结扎肝脏不会发生氨中毒;谷氨酸钠可以治疗肝性脑病。
6注意事项
6.1肝脏手术时,动作宜轻柔,以免肝脏破裂出血。 6.2剪断镰状韧带时,注意不要损伤肝脏与膈肌。
6.3十二指肠插管方向要向空肠方向,并防止复方氯化铵溶液溶液溢出漏入腹腔。
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