第34卷第1期 2012年2月 三峡大学学报(自然科学版) J of China Three Gorges Univ.(Natural Sciences) VoI.34 NO.1 Feb.2012 吉祥草根茎化学成分研究 王 倩 郭志勇 邹 坤 (三峡大学化学与生命科学学院天然产物研究与利用湖北省重点实验室,湖北宜昌443002) 摘要:目的:研究吉祥草根茎中化学成分,寻找抗肿瘤活性物质.方法:运用反相常压柱色谱和制备 高效液相对其化学成分进行分离,通过理化性质和波谱分析方法鉴定结构.结果:从吉祥草根茎的 乙醇提取物中分离得到3个甾体化合物及2个黄酮,经鉴定其结构分别为nicotianoside B(1),胡 萝卜苷(2),p-ecdysone(2fl,33,14a,20R,22R,25一hexahydroxy一5 cholest-7一an一6一one)(3),槲皮素 (4),芦丁(5).结论:化合物3为首次从该属植物中分离获得. 关键词:吉祥草; 抗肿瘤活性; 皂苷; 黄酮 中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1672—948X(2012)01-0082-03 Studies of Chemieal Constituents from Rhizome of Reineckia C『nrnea Wang Qian Guo Zhiyong Zou Kun (H ubei Key Laboratory of Natural Products Research&Development,College of Chemistry&Life Science, China Three Gorges Univ.,Yichang 443002,China) Abstract To study the chemical constituents from rhizome of Reineckia carnea and search for bioactive com- pounds with potential antitumor activity.The compounds were isolated by RP—Cis column chromatography and preparative HPLC.The structures of the compounds were identified on the basis of the spectroscopic a— nalysis and chemical evidences.Three steroids(1—3)and tWO flavonoids(4—5)were obtained from the Reineck- ia carnea rhizomes.Their structures were determined as Nicotianoside B(1),Daucosterol(2),p-ecdysone(2口, 3fl,14a,20R,22R,25一hexahydroxy一5 cholest一7一en~6一one)(3),Quercetin(4)and Rutin(5),respectively. Compound 3 was isolated from the Reineckia carnea for the first time. Keywords Reineckia carnea; antitumor activity; steroids; flavonoids 吉祥草为百合科吉祥草属植物吉祥草Reineckia 性.为充分利用湖北长阳地区丰富的吉祥草资源,本 文对其乙醇提取物进行系统分离,得到并鉴定了6个 化合物,分别为nicotianoside B(1),胡萝b苷(2), ecdysone(2 ,3口,14a,20R,22R,25一hexahydroxy一5 carnea(Andr)Kunth的全草,别名观音草、松寿兰、 小叶万年青,是百合科植物中的单种属植物L1].吉祥 草主要分布在华东、中南、西南各省区,是我国西南苗 族地区常用的传统草药之一.全草入药,能润肺止咳、 平喘、祛风、接骨、治肺结核咳嗽,也可用于补肾壮腰、 咯血、慢性支气管炎、风湿性关节炎,外用可治跌打损 伤[2].现代药理研究表明吉祥草具有良好的抗真 菌啪、溶血、止血、化痰、抗炎[ 、及抗肿瘤嘲等药理活 cholest一7一an一6一one)(3),槲皮素(4),芦丁(5).其中化 合物3为首次从该属植物中分离获得. 1仪器和试剂 多功能强制渗漉罐,温州鸿驰化工医药设备有限 收稿日期:201卜12—1O 基金项目:国家自然科学基金面上项目(30870254,31070313) 通信作者;邹坤(1962一),男,教授,博士,博士生导师,主要从事天然产物研究与利用工作.E—mail:kzou@ctgu.edu.cn 第34卷第1期 王倩,等吉祥草根茎化学成分研究 83 公司;高效液相色谱仪,Varian公司;中压制备色谱 柱YMC(2O mm×250 mm,5 m),半制备色谱柱 YMC(10 mm×250 mm,5“m),分析型色谱柱YMC 24),28.5(C_25),67.1(C一26),17.0(C-27),101.9 (glc,C-1),78.6(gle,C-2),77.7(glc,C_3),71.8 (gle,C一4),74.3(glc,C一5),68.9(gle,C一6),98.5 (Rha,C一1),71.8(Rha,C一2),70.2(Rha,C-3), (4.6 mm×250 mm,5 m);质谱用Finnigin电喷雾质 谱仪测定;核磁共振用Bruker A-4oo核磁共振仪测 定,TMS为内标,氘代试剂作溶剂;反相硅胶为进口 YMC RP—C18;高效液相用甲醇、乙腈均为色谱纯,水 为三蒸水. 实验用吉祥草采自湖北长阳,经三峡大学化学与 71.9(Rha,C一4),70.2(Rha,C-5),19.5(Rha,C_ 6).通过与文献E6]数据比较,与化合物nicotianoside B的波谱数据一致,因而确定化合物1为nicotiano- side B. 化合物2:无色针晶(甲醇),mp291~292℃.1H, 生命学院陈发菊博士和王玉兵老师鉴定为吉祥草属 植物吉祥草Reineckia carnea(Andr)Kunth的根茎, 标本保存于三峡大学化学与生命科学学院天然产物 研究与开发湖北省重点实验室内,标本编号为KN— PD22OO60628. 2提取与分离 将吉祥草根茎烘干粉碎(4.0 kg),以90 的乙醇 用多功能强制渗漉罐加热回流提取3次,合并提取 液,浓缩成浸膏,用水悬浮,分别以石油醚、乙酸乙酯、 正丁醇萃取,回收溶剂,得各部位浸膏分别为130 g、 112 g、550 g.取乙酸乙酯部位浸膏经硅胶柱色谱,以 氯仿一甲醇(15:1)洗脱,然后用丙酮重结晶,得到化 合物1和2.取正丁醇部位浸膏经氯仿一甲醇硅胶柱层 析得到50个流份(Fr 1-50),其中Fr 35—4O合并经中 压制备高效液相(乙腈/水(v/V)一20:80,检测波长 203 nm)得到化合物3,Frl2—15合并经半制备高效液 相(甲醇/水(V/v)一30:70,检测波长350 nm)得到 化合物4—5. 3 结构鉴定 化合物1:无色针晶(甲醇),mp240~242℃,分 子式C39 H6 Ol2.ESI-MS m/z 747[M+Na] . H— NMR(CD3OD,400MHz):8 0.79(3H,s,H一18),8 1.1O(3H,s,H-19),0.98(3H,d,J一6.9 Hz,H一 27),1.08(3H,d,J:7.1 Hz,H一21),3.78(1H, m,H一3).”C—NMR(CD30D,100 MHz):艿34.4(C一 1),27.6(C一2),77.2(C一3),27.1(C一4),43.4(C一5), 27.0(G6),36.7(C_7),41.2(C-8),57.4(C一9), 32.8(C-10),22.2(C一11),41.6(C一12),40.2(C- 13),66.1(C-14),32.7(C一15),82.3(C一16),63.7 (C一17),18.2(C一18),14.7(C一19),43.2(C一2O), 16.4(C一21),111.1(C-22),27.1(C_23),26.7(C一 ¨C—NMR(Py—d ,400 MHz)数据与文献E73报道的胡 萝卜苷一致.将化合物与胡萝卜标准品作TLC对照, 经不同溶剂系统展开,其Rf值一致,故鉴定该化合物 为胡萝b苷. 化合物3:白色粉末,mp238~240℃,分子式Cz H44O7. H—NMR(CD30D,400 MHz): 0.89(3H, s,H一19),0.96(3H,s,H一18),1.19(3H,s,H一 21). C_NMR(CD3OD,100 MHz): 37.3(C_1), 68.7(C一2),68.5(C一3),32.8(C-4),51.8(C-5), 206.4(C-6),122.1(C-7),168.0(C-8),35.1(C-9), 39.3(C-10),21.5(C_11),32.5(C_12),49.6(C一 13),85.2(C-14),31.8(C-15),21.5(C-16),50.5 (C一17),18.1(C一18),24.4(C-19),77.9(C-20), 21.1(C一21),78.4(C一22),27.3(D23),42.4(C- 24),71.3(C一25),29.7(C-26),29.0(C_27).以上数 据与文献[8]报道基本一致,故鉴定为 ecdysone (2』9,3p,14a,20R,22R,25一hexahydroxy-5 eholest一 7一an一6一one),此化合物为首次从吉祥草中分离得到的 蜕皮甾酮类化合物. 化合物4:黄色针状结晶(甲醇),mp314 ̄316℃, 分子式C15 H1。o7.1H—NMR(MDSO-d6,400MHz) 显示5个活泼酚羟基质子信号,分别为艿12.5(1H, s),10.11(1H,s),9.37(3H,s),其中8 12.5(1H,s) 为黄酮类化合物5位酚羟基的特征信号.另较高场处 显示出5个芳香质子信号,艿6.43(1H,d,J一2.0 Hz)和占6.21(1H,d,J一2.0 Hz)分别为黄酮A环 8位和6位质子信号,艿7.7O(1H,d,J=2.2 Hz), 7.56(1H,dd,J一8.5,2.2 Hz),6.91(1H,d,J= 8.5 Hz)呈明显的ABX自旋偶合系统,为B环2 ,6 和5 质子信号.其1H—NMR谱数据与文献[9]中槲 皮素的数据基本一致,与槲皮素对照品共薄层,二者 Rf值一致,故鉴定为化合物4为槲皮素. 化合物5:淡黄色粉末,mp187~190℃,分子式 C27H3。O16.1H(DMSO-d6,400 MHz):艿7.66(1H, s,H一2 ),7.62(1H,d,J=8.4 Hz,H一6 ),6.86 (1H,d,J===8.4 Hz,H一5 ),6.37(1H,s,H一8), 84 三峡大学学报(自然科学版) 2012年2月 6.19(1H,S,H一6).”C—NMR(MDSO—d ,100 MHz): 156.3(C一2),133.2(C-3),177.2(C-4), [3]陈昌祥,周 俊.蜘蛛抱蛋根茎中的甾体皂苷[J].云南 植物研究,1994.16(4):397—400. 161.1(C-5),i00.6(C一6),156.5(C一7),100.6(C一 8),156.5(C-9),103.8(C-10),121.5(G1 ),115.1 (C一2 ),148.3(C-3 ),144.6(C-4 ),116.1(C一5 ), 121.0(C-6 ),103.8(glc,C-1),73.9(glc,C-2), 76.3(glc,C一3),70.2(glc,C-4),75.8(glc,C-5), [4]张元,杜 江,许建阳,等.吉祥草总皂苷溶血、止咳、 化痰、抗炎作用的研究[J].武警医学,2006,17(4):282— 284. 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[责任编辑周文凯] (上接第68页) 2)通过对锯片应力的极差分析可得知:夹紧比增 石家庄:河北工业大学,2005. 加可以降低锯片的径向最大应力和切向最大应力,两 者几乎成线性关系.回转速度增加可以大幅度的提高 径向最大应力和切向最大应力,而圆锯片厚度增加则 影响不大.同时得到了各因素水平对锯片应力影响的 主次顺序. 臧勇,李同金,陶登奎,等.圆锯片的有限元模态分析 [J].重型机械,2002,49(1):49—52. 马云善,李 远,徐西鹏.锯切参数与锯片结构对锯片临 界载荷影响的有限元分析[J].工具技术,2006,40(12): 18—22. 林清快,梁开明.金刚石圆锯片结块尺寸对切削效率消 3)综上分析,最终确定了锯切参数的最佳水平组 合为:A3B2C2,即锯片的夹紧比为0.4,锯片的回转 速度为228 rad/s,锯片的基体厚度为2.2mm,节块厚 度为2.8 mm.这样即保证了锯片良好的动态稳定性, 耗的影响口].金刚石与磨料磨具工程,2000,2(116):15— 16. 林辉,李湘祁.金刚石圆锯片锯切用量的研究[J].石 材,2008,25(15):12-16. 同时也满足了锯切效率和石材的利用率.这种理论上 的参数最优组合,可以为实际的锯切加工生产提供重 要的理论依据. 参考文献: [13 习宝田.固有频率在衡量圆锯片稳定性与适张度方面的 作用[J].林产工业,1990,26(5):12—15. [2] 吴佳宾.基于有限元法的金属圆锯片动态特性研究[D]. 廖永平.正交试验法在机械工业中的应用[M].北京:中 国农业机械出版社,1984. 郑春英,张进生,王 志,等.金刚石圆锯片锯解花岗岩 切削力及参数优化的实验研究[J].工具技术,2010,44 (7):12-15. 邹家祥.圆锯片的动态特性[J].北京科技大学学报, 1994,16(增刊):94-97. [责任编辑张莉]