文章编号:1007-8614(2011)03-0193-04
刺糖对小鼠肠推进和离体小肠平滑肌运动的影响
曹雯丽,贾舒安,陈 阳,罗 渝,张 妹,米克热木·沙衣布扎提
(农业大学动物医学学院,乌鲁木齐 830052)
摘 要: 通过观察刺糖对小鼠离体小肠和在体小肠平滑肌运动的影响,以中华墨汁的推进距离与小肠总长的比值计算小肠推进率;采用离体肠管平滑肌收缩实验,以小鼠小肠平滑肌的收缩幅度、收缩频率及运动指数为指标,观察在正常台氏液中刺糖对小鼠离体肠管的影响,同时观察胃肠通和阿托品对不同浓度刺糖的作用。结果表明,刺糖可增强小鼠小肠运动功能(P<0.01),但与胃肠通相比作用缓和(P<0.01)。35%,70%刺糖溶液均可促进正常离体肠管的收缩功能(P<0.01,P<0.01),能拮抗阿托品引起的舒张作用(P<0.01,P<0.01)和胃肠通引起的收缩运动(P<0.01,P<0.01)。体内外实验结果表明,刺糖对小鼠小肠运动在体内外均具有调节作用。关键词: 刺糖;小鼠;小肠推进;离体小肠中图分类号:S852.2 文献标识码:A
EffectsofSaccharumAlhagionPropulsionofSmallIntestineandMovementofIsolatedSmallIntestinalSmoothMuscleofMice
CAOWen-li,JIAShu-an,CHENYang,LUOYu,ZHANGMei,Mikeremu.Shayibuzhati
(CollegeofAnimalMedicine,XinjiangAgriculturalUniversity,Urumqi830052,China)
Abstract: ThisexperimentwasconductedtoobservetheeffectofSaccharumAlhagionthemovementofsmallintestineofmicebothinvivoandinvitrotocalculatetheratioofpropulsionofpropulsiondistancemarkedbyinfusinginkinthesmallintestineandtotallengthofsmallintestine.Basedoncontractiontestofthesmallintestinesmoothmuscleandcontractionrangeandcontractionfrequencyandthemovementin-dex,theeffectofSaccharumAlhagiontheisolatedsmallintestinalsmoothmuscleofmice,andtheeffectofbethanecholchlorideandatropineonSaccharumAlhagiwithdifferentconcentrationwereobserved.There-sultsshowedthatSaccharumAlhagicouldenhancemovementfunctionofsmallintestinalpropulsioninmice(P<0.01),butmilderthanbethanecholchloride(P<0.01).TheSaccharumAlhagiintheconcen-trationsofboth35%and70%couldpromotethecontractilityofsmallintestinalsmoothmusclestrip(P<0.01,P<0.01)andcouldinducethestimulationofatropine(P<0.01,P<0.01),andthecontractionmovementcausedbybethanechlchloride(P<0.01,P<0.01).ItisindicatedthatSaccharumAlhagicouldstimulatemovementofmicesmallintestinebothinvivoandinvitro.Keywords: SaccharumAlhagi;mice;smallintestinalpropulsion;isolatedsmallintestine 刺糖是豆科骆驼刺属植物骆驼刺(AlhagipseudoalhagiDesv.)的分泌糖粒,民间用于治疗神经性头痛[1],是用于滋补强壮和平衡体液、润肠
收稿日期:2011-03-09
基金项目:农业大学紧缺人才专业大学生创新项目(jqrcp2201029)通讯作者:米克热木·沙衣布扎提,E-mail:12102012@qq.com
通便、调节内分泌的常见验方。如今刺糖只用于对人类疾病的治疗,特别适用于婴幼儿,其研究仅为成
分分析阶段[2-4],药效方面甚少。动物疾病防治上
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的应用尚未见报道。刺糖在药源丰富,价格低廉,本研究就刺糖对小鼠在体和离体小肠平滑肌收缩功能进行初步探讨,为其在兽医领域,尤其是幼畜胃肠道疾病中推广应用提供理论依据。
5min内的收缩振幅、频率(每5min收缩次数)及运动指数,再计算出1min这3项指标给药前后差值的平均值和标准差,本研究规定肠的运动指数=肠的收缩频率×收缩幅度[7,8]。
1.2.3 胃肠通、阿托品对不同浓度刺糖作用的影响实验分5组:正常台氏液对照组、胃肠通组、胃肠通+17.5%刺糖溶液组、胃肠通+35%刺糖溶液组、胃肠通+70%刺糖溶液组。实验方法同1.2.2。给药方法:离体小肠平滑肌稳定15~30min后,平滑肌浴槽内先加入胃肠通,描记舒缩曲线5min,然后用新鲜的37℃台氏液冲洗3遍,待肠管收缩稳定后先加入胃肠通,待其作用明显时再加入刺糖溶液,比较其收缩幅度与单用胃肠通组有无显著性差异。对照组加入等体积台氏液,其收缩幅度与胃肠通组比较[6]。阿托品对不同浓度刺糖的作用:实验方法和给药方法同1.2.3。1.2.4 数据处理
以SPSS17.0统计软件进行统计分析,不同药物组间采用单因素方差分析(One-WayANOVA)和LSD多重比较进行分析,结果均以平均值±标准差表示
[6]
1 材料与方法
1.1 材料
刺糖购自维吾尔医医院,硫酸阿托品注射液(山西省芮城县红宝兽药有限责任公司)、消食健
胃通便针(简称胃肠通,西乡长江动物药品有限责任公司)、0.9%生理盐水、中华墨水(上海精细文化用品有限公司)、台氏液:NaCl8.0g,KCl0.2g,MgCl2·6H2O0.214g,NaH2PO40.05g,NaHCO31.0g,CaCl20.2g,葡萄糖1.0g,蒸馏水1000mL,现用现配[5]。PowerLab10T生物机能实验系统、HW-400s恒温平滑肌槽(成都泰盟科技有限公司)、肌肉张力换能器。昆明系小鼠,体重18~22g(医科大学试验动物中心)。1.2 方法1.2.1 刺糖对小鼠小肠推进的影响
取昆明小鼠24只,雌雄各半,随机分成6组:生理盐水组、硫酸阿托品组、35%的刺糖溶液组、胃肠通组,刺糖加硫酸阿托品组和刺糖加胃肠通组,每组4只。各组动物实验前禁食8h,自由饮水。取健康小鼠,灌胃生理盐水0.2mL/10g(硫酸阿托品和胃肠通腹腔注射剂量为0.1mL/10g,刺糖灌胃剂量为0.2mL/10g),过20min以后,灌胃中华墨汁0.2mL/只,再过20min以后将小鼠颈椎脱臼处死,切开腹腔,剪取幽门至回盲部的肠管,测量小肠全长(幽门至回盲部的距离)及中华墨汁在小肠内推进的距离,计算中华墨汁的推进率[6]。1.2.2 不同浓度刺糖对小鼠离体肠管收缩的影响
实验分4组:17.5%刺糖溶液组、35%刺糖溶液组、70%刺糖溶液组、正常台氏液对照组。每组4段肠管。实验前将小鼠禁食8h,自由饮水,将小鼠颈椎脱臼处死,切开腹腔,剪取幽门至回盲部的肠管,用台氏液将内容物冲洗干净,剪成1.0~1.5cm数段备用。小段肠管对角线固定于通气管和张力换能器之间,负荷1.5g,平衡15~30min。待肠管自发收缩活动平稳后,记录5min的肠管正常运动曲线。用注射器往浴槽中加入各种药液(每次给药0.4mL,对照组加入等体积正常台氏液),继续描记舒缩曲线5min,用台氏液反复冲洗3次,待肠段舒缩恢复正常后才可进行下一次给药,无法恢复正常舒缩的肠段弃去。分别记录给药前及给药后肠段
。
2 结果与分析
2.1 刺糖对小鼠小肠推进运动的影响
表1结果表明,刺糖对正常小鼠小肠运动有明显的推进作用(P<0.01),但是相比胃肠通组对小肠的推进作用较为缓和(P<0.01),刺糖能缓解硫酸阿托品的抑制作用(P<0.01),同时也能缓解胃肠通对小肠平滑肌的兴奋作用(P<0.01)。
表1 刺糖对正常小鼠小肠推进的影响(X ±S,n=4)Table1 TheeffectofSaccharumAlhagionsmallintestinal
propulsionofnormalmice(X±S,n=4) 组 别生理盐水组阿托品组刺糖组胃肠通组刺糖加阿托品组刺糖加胃肠通组
推进率(%)31.14±4.48Cc20.32±1.81Dd58.65±5.17Bb81.44±12.56Aa37.72±10.56Cc60.85±6.59Bb
注:数据后不同小写字母表示同列不同处理间差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),下同。
2.2 刺糖对正常离体小肠平滑肌运动的影响
本研究规定的运动指数是一项重要指标,它包
第3期曹雯丽,等:刺糖对小鼠肠推进和离体小肠平滑肌运动的影响
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含了收缩波的幅度和频率两项信息。由表2可知,与正常台氏液组比较,17.5%刺糖溶液对离体小肠
平滑肌的收缩性差异不显著(P>0.05),35%刺糖溶液与70%刺糖溶液均可增加小肠平滑肌的运动指数,表现为收缩频率和幅度增加(P<0.01,P<0.01),从运动指数来看,后者促进作用更显著(P<0.01)。
2.3 胃肠通对不同浓度刺糖作用的影响
由表3知,胃肠通组与正常台氏液组比较,肠管收缩频率和幅度明显升高(P<0.01)。与胃肠通组比较,胃肠通+35%刺糖溶液组和胃肠通+70%刺糖溶液组能降低肠管的收缩频率和收缩幅度(P
<0.01,P<0.01),从运动指数来看,后者作用更明显(P<0.05)。说明一定剂量的刺糖对胃肠通具
有拮抗作用(图1)。2.4 阿托品对不同浓度刺糖作用的影响
表4结果表明,阿托品组与正常台氏液组比较,肠管运动指数明显降低,表现为收缩频率和幅度降低(P<0.01)。与阿托品组比较,阿托品+17.5%刺糖溶液组对离体小肠平滑肌的运动指数没有影响,而阿托品+35%刺糖溶液组和阿托品+阿托品+70%刺糖溶液组可使肠管的收缩频率和运动指数显著增加(P<0.01,P<0.01)。说明一定剂量的刺糖对阿托品具有拮抗作用(图1)。
表2 刺糖对正常离体小肠平滑肌运动的影响(d ±Sd,n=4)
Table2 TheeffectofSaccharumAlhagionsmoothmuscleofnormalisolatedsmallintestineofmice(d ±Sd,n=4)
组 别正常台氏液组17.5%刺糖溶液组35%刺糖溶液组70%刺糖溶液组
给药前后差值
频 率0.85±1.43Bb0.86±2.17Bb3.01±0.Aa5.28±1.31Aa
幅 度0.12±0.53Bb0.08±0.80Bb1.47±0.78Aa2.03±0.67Aa
运动指数18.52±29.37Cc18.68±38.78Cc87.33±6.10Bb155.77±37.77Aa
表3 胃肠通对不同浓度刺糖作用的影响(d ±Sd,n=4)
Table3 TheeffectofbethanecholchlorideonSaccharumAlhagiactionwithdifferentconcentrations(d ±Sd,n=4)
组 别正常台氏液组胃肠通组
胃肠通+17.5%刺糖溶液组胃肠通+35%刺糖溶液组胃肠通+70%刺糖溶液组
给药前后差值
频 率0.29±0.37Ba3.37±1.15Aa3.35±1.00Aa1.43±0.67Bb-0.82±0.93Cc
幅 度0.96±0.57Bb3.33±0.45Aa3.17±1.36Aa1.55±0.81Ab1.43±0.69Bb
运动指数24.41±10.46Bb150.23±51.80Aa145.66±31.38Aa65.00±12.97Bb3.02±32.72Bc
表4 阿托品对不同浓度刺糖作用的影响(d ±Sd,n=4)
Table4 TheeffectofatropineonSaccharumAlhagiactionwithdifferentconcentrations(d ±Sd,n=4)组 别正常台式液组阿托品组
阿托品+17.5%刺糖溶液组阿托品+35%刺糖溶液组阿托品+70%刺糖溶液组
给药前后差值
频 率0.44±2.19Aa-4.40±0.19Bb-3.31±0.78Bb0.14±1.35Aa0.76±0.84Aa
幅 度0.33±0.37Aa-1.±0.92Bb-1.69±0.Bb0.30±0.Aa0.33±0.40Aa
[5,9]
运动指数19.68±56.53Aa-129.5±24.15Bb-109.03±43.20Bb
4.30±44.35Aa26.27±23.74Aa
3 讨论
刺糖含有大量不同种类的维生素和微量元素,并含有大量糖类,还有天冬氨酸、牛磺酸等氨基酸和
少量黄酮,具有滋补强壮,精液浓缩,益精壮阳,涩肠止痛,祛痰止咳的功效[10,11]。本实验结果表明,刺糖对正常小鼠运动有比较明显的推进作用,但较胃肠通的作用缓和,所以刺糖适合年幼、体弱、老
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图1 小肠平滑肌运动
Fig.1 Movementofsmallintestinalsmoothmuscle
年病患。据刘妍妍等[12]报道,一定剂量的牛磺酸可激活Ca通道促进细胞外Ca内流,从而增强肠
平滑肌收缩的作用[6]。本研究中刺糖对肠道的显著增强作用可能归因于刺糖中的牛磺酸。
阿托品为M胆碱受体阻断药,抑制平滑肌收缩。胃肠通与乙酰胆碱作用相似,是平滑肌内兴奋传递的化学物质,能激动M、N胆碱能受体,并能促进胆碱能神经末梢释放乙酰胆碱,兴奋胃肠道,使其收缩幅度增加。本实验结果表明,35%和70%刺糖溶液能拮抗阿托品对小鼠离体肠平滑肌的舒张作用以及胃肠通对小鼠离体肠平滑肌的收缩作用,提示刺糖对小肠平滑肌的作用可能与对M胆碱能受体有关,其双向调节机制有待于利用特异性受体进行进一步研究。
刺糖对肠平滑肌的这种双重调节作用,对临床上许多消化系统疾病的治疗有很大的帮助,可为开发预防、治疗某些胃肠道疾病的药物提供基础理论依据。参考文献:
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