盘查喧签 堂隧堂拯 ０＿＿笙亟 鲞笙 塑 ・论著・ 血清胃蛋白酶原水平测定在胃疾病中的作用 陶 梅 张玲霞 张 沥 庄 坤 张宁霞 方亚利 【摘要】 目的通过测定血清胃蛋白酶原（ＰＧ）Ｉ、ＰＧⅡ水平及其比值变化，探索血清胃蛋白酶原 与胃部病变的关系。方法本研究采用观察性病例一对照研究，共８３４例受检者纳入研究。在做血清 试验前，入选者诊断都经活检组织病理学检查证实，并根据病理结果将受检者分为糜烂性胃炎组１０６ 例、萎缩性胃炎组２０８例、胃溃疡组１０２例、十二指肠球部溃疡组１０８例、胃癌组１０６例．正常组２０４例， 每ｌ例均用酶联免疫吸附试验（Ｅ１ ＩＳＡ）定量测定空腹血清ＰＧＩ和ＰＧ１１。结果ＰＧＩ和ＰＧＲ（ＰＧＩ／ ＰＧＩＩ）水平在糜烂性胃炎组（１４０．７１士３１．５ｌｌ￣ｇ／Ｌ，１４．０６±５．０１）、十二指肠溃疡组（１４５．４３±３４．１５ ｇ／ Ｌ，１５．２４±４．１１）和胃溃疡组（１４１．６３±３３．２６／￣ｇ／Ｌ，１４．７ｌ士１．９１）显著增高，在萎缩性胃炎组（８８．５３± １７．９５“ｇ／Ｉ…７ ２６±２．５１）明显低于正常组（１２４．８９±３３．２６￣ｇ／Ｌ，１１．１９±４．７９），在胃癌组（４９．７６±１９． ｓ２ ｇ／Ｌ，３．７６±１．２１）明显低于正常组和萎缩性胃炎组（均Ｐ＜０．０５）。结论ＰＧ Ｉ、ＰＧＲ水平显著低 下可作为萎缩性胃炎和胃癌筛查的有效手段，有助于提高胃癌早诊率。 【关键词】 胃疾病 胃癌 胃蛋白酶原 Ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ ＴＡＯ Ｍｅ￣，ｅｔ ａ１．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏ— ｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，Ｘｉ＇ａｎ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉ＇ａｎ，Ｓｈａｎｘｉ ７１０００３，ｔｈｅ Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉ ａｎｄ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ ｌｅｖｅｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ ｃａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ａｎｄ ８３４ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ．Ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ＇ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｗａｓ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｂｙ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｐｓｙ ｂｅｆｏｒｅ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｔｅｓｔｓ．Ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ６ ｇｒｏｕｐｓ：１０６ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｅｒｏｓｉｖｅ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ．２０８ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ，１０２ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｉｃ ｕｌｃｅｒ，１０８ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｄｕｏｄｅｎａ１ ｕｌｃｅｒ。１０６ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ２０４ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏ１．Ｅｖｅｒｙ ｐａｔｉｅｎｔ＇ｓ ｐｅｐｓ￣ｎｏ— ｇｅｎ Ｉ ａｎｄ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉｆ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ ＥＬＩＳＡ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉ ａｎｄ ＰＧＲ（ＰＧ Ｉ／ＰＧ １Ｉ） ｌｅｖｅｌ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ ｅｒｏｓｉｖｅ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｇｒｏｕｐ（１４０．７１±３１．５１／，ｇ／Ｉ ，１４．０６±５．０１），ｄｕｏｄｅｎａＩ ｕｌｃｅｒ ｇｒｏｕｐ（１４５．４３±３４．１５￣ｇ／Ｉ 。１５．２４±４．１１）ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｕｋｅｒ ｇｒｏｕｐ（１４１．６３±３３．２６￣ｇ，／Ｉ ，１４．７１士 １．９１），ａｎｄ ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｇｒｏｕｐ（８８．５３±１７．９５￣ｇ／Ｉ ，７．２６±２．５１） ｔｈａｎ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（１２４．８９±３３．２６ｕｇ／Ｌ．１１．１９±４．７９）．Ａｎｄ ｉｔｓ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｇｒｏｕｐ（４９．７６±１９．５２￣ｇ／Ｉ～２ ７６±１．２１）ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｔｈａｎ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉ ａｎｄ ＰＧＲ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｍｅａｎｓ ｏｆ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｈｅｌｐ ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｄｉａｇ— ｎｏｓｔｉｃ ｒａｔｅ ｏｆ ｅａｒｌｙ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｓｔｏｍａｃｈ ｄｉｓｅａｓｅ Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ Ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ 胃蛋白酶原（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ，ＰＧ）是胃蛋白酶的前体，可分为 胃镜检查的胃十二指肠疾病患者。人选者诊断须经活检组织 两种免疫活性不同的亚群：ＰＧＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉ）和ＰＧＩＩ（ｐｅｐ— 病理学检查证实，在纳入本研究前１周内无特殊用药史（包括 ｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ）＿１］，由胃体粘膜的主细胞和粘液颈细胞分泌，ＰＧＩＩ 质子泵抑制剂、Ｈｚ受体拮抗剂等）。共分为五组：１）正常对照 也可由胃窦的幽门腺和十二指肠腺（Ｂｒｕｎｎｅｒ腺）分泌。当胃 组：粘膜正常或示轻度非萎缩性胃炎，共２０４例，年龄ｊ ２～７８ 粘膜发生病变时，ＰＧ分泌细胞受累．血清ＰＧ水平也发生相 岁．平均年龄４６岁；２）糜烂性胃炎组：共１０６例，年龄１ ８～７８ 应的变化。因此，血清ＰＧ水平变化可在一定程度上反映胃 岁，平均年龄４２岁；３）萎缩性胃炎组：共２０８例，年龄１２～９６ 粘膜变化，检测血清ＰＧ水平及其比值变化对诊断胃部病变 岁，平均年龄 ２岁；４）胃溃疡组：共ＪＯ２例，年龄３３～７３岁， 及其部位具有一定意义。日本学者曾以血清ＰＧｌ和ＰＧＩ／ 平均年龄５２岁；５）十二指肠球部溃疡组：共１０８例，年龄１４ ＰＧＩＩ比值的下降作为胃癌大规模人群筛查的标志，并对其可 ～８ｌ岁，平均年龄４６岁；６）胃癌组：共１０６例，年龄３１～７８ 行性进行了研究，认为其价值与ｘ线筛查方法相当口 。在我 岁，平均年龄５６岁。受检者禁食８小时后采集静脉血液５ 国，这方面的研究也开始引起越来越多学者的关注Ｆ ａ ４］。 ｍｌ，２ ０００ ｘｇ离心１０ｒａｉｎ，分离血清３ ｒｎｌ，标本贮存于一７０‘Ｃ １材料与方法 低温冰箱中待测。于胃窦部距幽门２～３ ｅｌｌ１处、胃体部距贲 １．１ 研究对象 为２００７年３月～２００９年３月因各种原因行 门８ ｃｍ处的大小弯侧各取胃粘膜标本一块，１００ ｎｉｌ／Ｌ福尔马 基金项目：本课题受陕西省科技厅科研基金资助。编号：２００７ｋ０９ 林固定后送病检。 Ｏ３一（４】 １．２检测方法 胃粘膜标本行常规ＨＥ染色，根据全国慢性 作者单位：陕西省西安市中心医院消化科 胃炎共识意见标准做出诊断［ 。血清ＰＧＩ、ＰＧＩＩ含量检测采 邮 编 ７１０００３ 收稿ｋｔ期 ２Ｏ１０…０７ １２ 用酶联免疫吸附测定（ＥＵＳＡ）法，严格按照说明书进行操作。 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｑｉｑｉｈａｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．１５ ＰＧＩ、ＰＧＩＩ试剂盒由上海艾柯特医疗产品公司提供（ＢＩＯＨｉｌ’， 高，表明血清ＰＧＩ含量及ＰＧＩ／ ＰＧＩＩ比值变化与上述疾病的 Ｃａｔ．Ｎｏ．６０１０ｉ００１）。 发生、发展密切相关。 １．３统计学分析应用ＳＰＳＳ ｌ１．５统计软件，两组间数据行 慢性萎缩性胃炎被认为是胃癌前状态，以胃窦为主萎缩 两样本ｔ检验，多组问数据行方差分析，Ｐ＜０．０５为差 性胃炎患者患胃癌的危险性较正常人高１８倍，若胃窦和胃体 异有统计学意义。 均存在粘膜萎缩，则其危险性高达正常人的９Ｏ倍。研究指 ２结果 出ｉ“ ，血清ＰＧＩ降低（＜５０ ｇｇ／ｍ１）对中、重度萎缩性胃炎最 ＰＧＩ和ＰＧＲ（ＰＧＩ／ＰＧＩＩ）水平在糜烂性胃炎组、十二 为敏感和特异，ＰＧＩ和ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比值与胃底粘膜表面积密切 指肠溃疡组和胃溃疡组显著增高，与正常对照组相比，差异具 相关，二者在萎缩性胃炎、肠化生和胃癌患者中随胃粘膜萎缩 有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＰＧＩ和ＰＧＲ在萎缩性胃炎组明 病变加重呈进行性降低。Ｆａｒｉｎａｔｉ等［】 研究发现，测定ＰＧ， 显低于芷常组（Ｐ＜０．０５）；在胃癌组不仅明显低于正常组， 特别是ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比值和ＰＧＩ水平，对于诊断慢性萎缩性胃 也显簪低于萎缩性胃炎组（Ｐ＜０．０５），见表１。 炎和肠化生有很高的价值，他们发现５１例胃癌中有７ｏ ＰＧＩ 表１各缉血清中ＰＧＩ和ＰＧＲ水平的比较 （一１－士 ） ＜２ｏ ｕｇ／ｍｌ，使用ＰＧＩｘＧ（胃泌素）指数，对胃癌检出阳性率为 ９２ ，特异性为９４ ，阳性预示值为７３ 。认为本方法所得 到的灵敏度、特异度和阳性预示值远优于其他标志物，如 ＣＥＡ、ＣＡ１９９、ＣＡ５０、ＣＡ７２４等。此外，在几乎全部的癌前病 变，如慢性萎缩性胃炎，上皮不典型增生的情况下，此指数均 处于异常低下状态。Ｙｏｓｈｉｈａｒａｌ】。 研究了ＰＧＩ和ＰＧＩ／ＰＧ／Ｉ 比值降低与胃癌发生率的关系，发现在ＰＧＩ和ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比 注：与正常对照组比较，ａＰ＜０．０５；与萎缩性胃炎相比较，ｂＰ＜ 值降低的人群中，胃癌的发病率远高于ＰＧ不降低者，普查检 ０．０５。 出的胃癌有９Ｏ 属于早期癌，远高于日本常规临床的胃癌早 诊率（５６．９ ）。本研究结果也证实，萎缩性胃炎组和胃癌组 ３讨论 血清ＰＧＩ含量及ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比值均较对照组显著降低，提示 早在上世纪八十年代，有学者就将ＰＧ检测称之为胃底 血清ＰＧ作为非侵人性诊断方法，对于萎缩性胃炎和胃癌的 腺粘膜“血清学活检”。ＰＧ为胃蛋白酶的前体，能反映主细胞 筛查提供了简便、经济的临床优势。因此，联合测定血清ＰＧＩ 的数量，可在胃液、血液和２４小时尿液中检测其含量。ＰＧ可 和ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比值进行慢性萎缩性胃炎和胃癌大规模人群普 分为ＰＧＩ和ＰＧＩ１两种，其中ＰＧＩ大量存在于胃体，而ＰＧＩＩ 查和筛查具有重要意义。 除胃体外，也见于胃窦、十二指肠近端和十二指肠腺（Ｂｒｕｎｎｅｒ 参 考 文 献 腺）。分泌进入胃腔的ＰＧ经酸解成有活性的胃蛋白酶，发挥 ［１］ Ｍｉｋｉ Ｋ，Ｍｏｒｔｔａ Ｍ，Ｓａｓａｊｉｍａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ 其消化蛋白质的作用。但也有少量透过胃粘膜毛细血管进人 ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｕｓｉｎｇ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．ＡＭ Ｊ Ｇａｓ— 血液中，故可以从血液中检测。当胃粘膜发生病变时，ＰＧ分 ｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００３，９８（４）：７３５—７３９ 泌细胞受累，血清中ＰＧ的含量也随之发生改变，血清ＰＧ水 ［２３ Ｏｈａｔａ Ｈ，Ｏｋａ Ｍ，Ｙａｎａｏｋａ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ 平反映了不同部位胃粘膜的形态和功能。当胃酸分泌增多时 ａ ｈｉｇｈ～ｒｉｓｋ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ Ｊａｐａｎ ｕｓｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｎｄ ＰＧＩ升高，胃酸分泌减少或胃粘膜腺体萎缩时ＰＧＩ降低，因此 ｂａｒｉｕｍ ｄｉｇｉｔａｌ ｒａｄｉｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉ，２００５，９６（１０）：７１３— ７２０ ＰＧＩ被称为检测胃泌酸细胞功能的指针。相对于胃窦粘膜， ＰＧＩｌ与胃底粘膜病变的相关性较大，其升高与胃底腺管萎 ［３３张祥宏，赵文元，孙旭明，等．胃癌高发区农村居民血清胃蛋白 酶原和胃泌紊分析［Ｊ］．中国公共卫生，２００２，１８（３）：２８７—２８８ 缩、腺上皮化生或假幽门腺化生、异型增生有关＿５］。ＰＧＩ／ ［４３孙丽萍，宫月华，王兰，等．辽宁庄河地区居民血清胃蛋白酶原 ＰＧＩＩ比值进行性降低与胃粘膜萎缩进展相关。因此，检测血 含量［Ｊ］．中华消化杂志，２００６，２６（１０）：６４９—６５３ 清ＰＧ水平及其比值变化对诊断胃部病变及其部位具有一定 ［５］ 中华医学会消化病学分会．中国慢性胃炎共识意见ＥＪ］．胃肠病 意义Ｕ－ｓ］。 学杂志．２００６，１１（１１）：６７４—６８４ 研究表明，在一般的胃炎患者中，血清ＰＧＩ是处于较高 ［６］刘慧杰，高华，董明，等．胃蛋白酶原Ｃ基因多态与胃癌遗传易 水平；而在萎缩性胃炎，ＰＧＩ总是处于低水平；但在此两种情 感性的相关性研究［Ｊ］．中华医学杂志，２００１，８１（１５）：９４７—９４８ 况下，血清ＰＧＩＩ均为高水平。因此，在大多数病理情况下， ［７］Ｍｕｋｏｕｂａｙａｓｈｉ Ｃ，Ｙａｎａｏｋａ Ｋ，Ｏｈａｔａ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏ— ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比值降低 ］。已有研究报道，血清ＰＧ水平在消化 ｇｅｎ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ，２００７，４６（６）： 性溃疡患者中显著升高，尤其以ＰＧＩ含量的变化最为明显， ２６１——２６６ 特别是在十二指肠溃疡的活动期，而ＰＧＩＩ的变化没有ＰＧＩ ［８］李月红，张祥宏，黄飚，等．胃癌高发区居民血清胃蛋白酶原水 显著。胃蛋白酶原的分泌量与胃酸排出量相平行，组织胃蛋 平及异常标准的研究［Ｊ３．中华流行病学杂志，２００６，２７（１０）： ８４０—８４４ 白酶原的定量研究也发现，十二指肠溃疡患者ＰＧ含量显著 ［９］Ｓｉｐｐｏｎｅｎ Ｐ，Ｈａｒｋｏｎｅｎ Ｍ，Ａｌａｎｋｏ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ａｔｒｏｐｈ— 高于正常，胃溃疡患者的ＰＧ水平也比正常人高。因此，血清 ｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｆｒｏｍ ａ ｓｅｒｕｍ ｓａｍｐｌｅ［Ｊ］．Ｊ Ｍｉｎｅｒｖａ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ＰＧ含量的升高可作为十二指肠溃疡和胃溃疡的危险因 Ｄｉｅｔｏｌ，２００３。４９（１）：１１—２１ 素Ｌ１ 。本研究结果显示，糜烂性胃炎组、十二指肠溃疡组和 ［１ｏ３朱岚．黄飚，张珏，等．不同人群胃蛋白酶原水平检测分析［Ｊ］． 胃溃疡组血清ＰＧＩ含量及ＰＧＩ／ＰＧＩＩ比值均较对照组显著增 中国公共卫生，２００９，２５（１０）：１ ２Ｉ６—１ ２１７ 齐齐哈尔医学院学报２０１０年第３］卷第１５期 结肠癌与直肠癌的ＭＶＤ对比研究 赵坤杜金荣 【摘要】 目的 本实验应用抗ＣＤ３４单克隆抗体标记大肠癌血管内皮细胞，测定微血管密度，进行 结肠癌和直肠癌的对比研究，探讨微血管生成在两部位肿瘤中的差异，从而为评估大肠癌的发生发展、 治疗及预后提供理论依据。方法 选择２００２年１月～２００４年１月问齐齐哈尔医学院附属第三医院收 治的结肠癌患者４５例和直肠癌患者４３例进入本研究。按病变部位分为直肠癌与结肠癌两组。按照肿 瘤分化程度、淋巴结转移情况、ｄｕｋｅｓ分期等对直肠癌与结肠癌的ＭＶＤ值进行对比，应用ＳＰＳＳ １３。０统 计分析软件进行处理，并用ｔ检验及Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ生存分析作统计。结果 直肠癌组与结肠癌组 ＭＶＤ比较，在相同的分化程度下，发生淋巴结转移的直肠癌与结肠癌，ｄｕｋｅｓ分期Ｃ期和Ｄ期的直肠癌 与结肠癌ＭＶＤ有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。对直肠癌与结肠癌生存时间进行比较，用 。检验 一５． ０９７，Ｐ一０．０２４，ｄＯ．０５有统计学意义。结论ＣＤ３４在结直肠癌组织新生血管有良好表达．可以作为 结直肠癌血管生成标记物用于结直肠癌ＭＶＤ计数有价值的标志物。在有淋巴转移的结直肠癌组织， 直肠癌的微血管密度高于结肠癌，且直肠癌患者的预后较结肠癌患者差。 【关键词】结肠癌 直肠癌 微血管密度 大肠癌根据解剖部位划分可分为结肠癌和直肠癌。直肠 癌是乙状结肠直肠交界处至齿状线之间的癌，与结肠癌统称 温度达到９８℃，保持５分钟后关火，移离火源，自然冷却至４０ ℃，入ＰＢＳ洗３次，每次５分钟；３）加过氧化物酶阻断溶液， 为大肠癌，在我国近２Ｏ年来，尤其在大城市，发病率明显上 升。目前国内外研究的热点集中在肿瘤组织内血管生成的研 究上。恶性肿瘤细胞的增殖离不开血管的生成，肿瘤生长和 转移需要新生血管提供营养成分。本研究应用抗ＣＤ３４单克 隆抗体标记大肠癌血管内皮细胞，测定微血管密度，进行结肠 以阻断内源性过氧化物酶活性，室温下孵育１Ｏ分钟，ＰＢＳ洗 ３次，每次５分钟；４）加非免疫性动物血清，以封闭非特异性 反应，室温下孵育１Ｏ～１５分钟；５）吸去多余血清，滴加一抗， ３７℃孵育６Ｏ分钟（或４℃过夜），ＰＢＳ洗３次，每次５分钟；６） 加链亲和素一过氧化物酶溶液，室温孵育１０～１５分钟，ＰＢＳ 癌和直肠癌的对比研究，探讨微血管生成在两部位肿瘤中的 洗３次，每次５分钟；７）ＤＡＢ显色：新鲜配制的ＤＡＢ５０扯ｌ，发 色１Ｏ～２０分钟，充分水洗；８）自来水冲洗，苏木精复染，弱氨 水返蓝；９）梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。 １．４ 对照免疫组织化学染色过程中，以ＰＢＳ代替…抗作阴 性对照，用已知ＣＤ３４阳性的大肠癌组织切片作阳性对照。 １．５微血管定量方法 微血管密度（ＭＶＤ），即单位面积的 微血管数目。参照Ｗｅｉｄｎｅｒ标准，微血管的判定不以是否形 差异，从而为评估大肠癌的发生发展、治疗及预后提供理论依 据。报道如下。 １ 临床资料与方法 １．１ 一般资料选择２００２年１月～２００４年１月间齐齐哈尔 医学院附属第三医院收治的结肠癌患者４５例和直肠癌患者 ４３例进入本研究。按部位分为直肠癌与结肠癌两组。所选 患者年龄５０～６１岁，其中男性直肠癌患者３１例，结肠癌患者 ３３例；女性直肠癌患者１２例，结肠癌患者１２例。所有患者 术前均未接受化疗、放疗或其他针对肿瘤的治疗。所有病例 无术中死亡，术后均行化疗治疗并对晚期直肠癌患者进行了 放疗治疗。全部病例均经手术和病理证实。５年后随访直肠 成管腔或管腔内有无红细胞为计数单位，凡呈现与邻近的微 血管明显分离，染色阳性（棕色）的单个内皮细胞或内皮细胞 簇均作为一个血管计数，凡管腔大于８个红细胞，及带较厚肌 层的血管均不记入微血管范围内。４Ｏ倍镜下确定５个不重 复新生血管最密集区，即“热点”，再于１００倍视野下利用计算 癌患者２５人生存，结肠癌患者３５人生存。 １．２材料主要试剂：鼠抗人ＣＤ３４单克隆抗体，ｓ—Ｐ免疫 组化试剂盒（单染），均由福建迈新生物技术开发有限公司提 机自动扫描整张切片，选定热点区域记录每个密集区中一个 视野内的微血管数，以同一张切片５个选定区域视野内微血 管数的平均值表示所要测量的微血管密度。 供；所有抗体均为既用型。 １．３ 染色方法及步骤免疫组织化学染色采用Ｓ—Ｐ法，其 步骤如下：１）石蜡切片常规脱蜡、水化后，用ＰＢＳ冲洗３次， 每次５分钟；２）将切片置入盛有抗原修复液的容器中，加热至 作者单位：哈尔滨医科大学第二附属医院病理科研究生哈尔医学院病理教研室（赵坤） 哈尔滨医科大学第二附属医院病理科研究生导师（杜金荣） 邮 编 １５００００ 收稿日期 ２０１０…０６—１２ （注：计算机自动记数的ＭＶＤ值略高于人工记数，但记 数恒定，客观性较强）。 ２结果 两组患者临床资料按照肿瘤分化程度、淋巴结转移情况、 ｄｕｋｅｓ分期对直肠癌与结肠癌的ＭＶＤ值进行对比，应用 工作于齐齐 ＳＰＳＳ１３．０统计分析软件进行处理，并用ｔ检验及Ｋａｐｌａｎ— Ｍｅｉｅｒ生存分析作统计。 直肠癌组：低分化程度者３例；中分化程度者３４例；高分 化程度者６例。淋巴结有转移者２２例；无淋巴结有转移者 ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，１９９１．４７（１）：７—１１ ［１３３ Ｙｏｓｈｉｈａｒａ Ｍ．Ｓｕｍｉｉ Ｋ，Ｈａｒｒｍａ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉ ａｎｄ Ｉ１ ｗｉｔｈ ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ａｄｅ— ［１１］ Ｋｏｄｏｉ Ａ，Ｙｏｓｈｉｈａｒａ Ｍ，Ｓｕｍｉｉ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｉｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，１９９５，３０（４）： ４５２—４６Ｏ ［１２］Ｆａｒｉｎａｔｉ Ｆ，Ｈｏｌｍｏｇｒｅｎ Ｊ，Ｄｉ—ＭａｒｉｏＦ，ｅｔ ａ１．ＣＡ５０ ｄｅｔｅｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｂｏｄｙ ｆｌｕｉｄｓ：ｃａｎ ｗｅ ｓｃｒｅｅｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｔ ｒｉｓｋ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ？ ｎｏｍａ ｉｎ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｓｕｂｊｅｃｔｓ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，１９９８，９３ （７）：１ ０９０—１ ０９６
