两种AMES试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究

来源：小侦探旅游网

【摘要】目的通过ames试验与彷徨试验对蒲葵子正丁醇提取物的致突变试验结果，比较两种试验的灵敏度。方法对蒲葵子用正丁醇浸提，用ames试验方法（掺入法）与彷徨试验方法，对ta100鼠伤寒沙门氏菌株进行致突变试验。结果两种试验方法结果显示，蒲葵子正丁醇提取物在5～500 μg/ml剂量范围，以ames试验方法与彷徨试验均检测出阳性结果，而在0.025 μg/ml 与0.5 μg/ml 剂量下，彷徨试验能检测出阳性结果，而ames方法未检测出阳性结果。结论在较低浓度时，彷徨试验能检测出ames试验检测不出的阳性结果，表明彷徨试验灵敏度较ames试验高。

【关键词】正丁醇提取物；ames；彷徨试验；灵敏度 1 材料 1.1 受试药物

蒲葵子正丁醇提取物：蒲葵子分别用95%乙醇回流提取，浓缩成浸膏后，用正丁醇反复浸提，得到提取物的浓缩部分(以下简称蒲葵子提取物)。

1.2 实验菌株鼠伤寒沙门氏菌变异株组氨酸缺陷型ta100(由美国sigma公司提供)，经鉴定为合格菌株，置于平板备用。

1.3 阳性对照物① 2-氨基芴，美国sigma公司；②叠氮钠，美国sigma公司。

1.4 ames试验培养液按文献方法［1］配制，彷徨试验培养液按美国sigma公司提供方法配制，体外活化系统(s9混合液)按标准方法经多氯联苯诱导大鼠肝微粒体酶制备而成［2］。

2 方法 2.1 ames试验用标准平板掺入法［1］，在经灭菌的45℃左右含顶层琼脂2 ml的试管中，依次加入受试物、菌液各0.1 ml，s9混合液0.5 ml，充分混匀后倒在底层培养基平板上铺平，37℃培养48 h，每次试验同时设阴性，阳性对照，每个浓度设两个平行平皿，每个受试物至少重复1次，计数平均每毫升回空菌落数。 2.2 彷徨试验（改进的ames试验）［3］取含组氨酸 (2 μg／m1)的培养液5 ml加过夜培养菌液0.1 m1，s9混合液0.1 ml和待测物0.1 ml，摇匀分装于50支小试管中，同时做阴性对照，37℃培养20 h，各管加入古溴甲酚紫(5 μg／m1)的培养液2 ml，继续培养3 d，计数变色管数。

因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容

查看全文