您好,欢迎来到小侦探旅游网。
搜索
您的当前位置:首页乳腺导管内乳头状肿瘤免疫学特征分析

乳腺导管内乳头状肿瘤免疫学特征分析

来源:小侦探旅游网
临床研究

乳腺导管内乳头状肿瘤免疫学特征分析

袁小庆

铜陵市人民医院 安徽省铜陵市 244000

【摘 要】目的:观测乳腺导管内乳头状肿瘤( intraductal papillary neoplasms, IDPN)的免疫特征,并且探讨分析其的诊断方法。方法:根据世界卫生组织分类等相关准则,挑选出乳腺导管内乳头状肿瘤的患者50位,对病人的组织进行切片,并对切片进行免疫组化染色和HE染色,选用的一抗有CK5、SMA、p63、CD10、CK34βE12。通过光镜下的观测得出实验结果。结果:CK5、SMA 在 IDPN 基侧细胞/肌上皮的表达水平有明显的差别(χ2=12.573, P≤0.05),SMA 相比于CK5较强;SMA 、CK34βE12在 IDPN 的基侧细胞/肌上皮的表达水平有显著的差异(χ2=25.793, P≤0.05),CK34βE12 相比于SMA较弱。结论:IDPN是一组良性恶性程度不同的病变,HE染色的形态和免疫组化染色都有差异,所以诊断IDPN时应采用HE染色和免疫组化染色相结合标准进行诊断。

【关键词】乳腺肿瘤;导管内乳头状肿瘤;免疫组织化学

世界卫生组织将 IDPN作为了一种单独的疾病列出[1],并将其认定为产生在乳腺的导管中的、由上皮增殖的覆盖着的纤维--脉管为轴心产成的乳头状样的病变,可以有(或)无肌上皮层。总括为下面几个类型:导管内的乳头状癌、非典型、型、周围型、囊内乳头状。IDPN是比较罕见的乳腺肿瘤,现在IDPN在类型分类和命名上以及良性恶性的判断标准方面有一定的分歧[2] [3]。因此,本实验对50例IDPN患者进行研究,以探讨其诊断标准,并且分析其诊断的方法。

微波炉对组织的抗原进修复,自然条件下逐渐冷却至三十到四十℃。用tri-ton浸泡,用百分之十的双氧水在室温灭活10 分钟,滴加相应的抗体(适宜的浓度),在冰箱4<条件下孵育过一夜。第二天拿出在37℃的条件下恢复温度(1小时),加二抗等相关的试剂。用DAB或其他显色剂显色,从脱水到用中性树胶封片,在光学显微镜下进行观察。并用NIS-Elements BR 3.2软件测定积分光密度值及阳性细胞数,进行统计学分析。细胞被DAB染成黄棕色的为阳性反应,显色时间在镜下观察确定。依据被染色的细胞数量和染

有AIDPoma的患者5位,其中伴随ID-Poma的有2位,伴有IDPoma的有1位,伴有IDPC的有1位;IDPC的患者21例,其在这之中有4位患者分别伴有AIDPoma和(或) IDPoma。20例患者因为肿瘤发生在大导管内、且周围能看见大导管无法充分伸展的 TDLU,从而将病人确定为型;周围型的乳头样瘤大多产生于在TDLU,发生的部位多在乳腺的周围,常常与其他病变一起产生,12 例患者的肿瘤在TDLU 里产生、周围存在比较多的能够充分伸展的 TDLU ,从而确定为而周围型;另外14 例患者既出现了大导管又能看见见有充分伸展的 TDLU,从而定义为亚节段导管与小叶外的终末的导管接合的部分。有5例患者因为出现的乳头状瘤个数多余或等于3个,从而将他们确诊为多发性。病变的HE染色后的形态、免疫组化的表达及诊断的标准均一样,所以,下面按照病例的主要诊断的成分加以叙述。2. 1 临床表现

符合标准分类标准的都为女性患者。年

1 材料与方法

1.1 材料

依据世界卫生组织乳腺肿瘤组织学分类( 2003)等分类标准,本课题组从首都医科大学附属友谊医院的病理科的档案中选出符合乳腺IDPN的病人50位。病人的组织都由百分之十的甲醛(中性)固定备用,用常规的石蜡包埋,用于切片。1.2 方法

蜡块3~5μm连续切片,进行HE染色和免疫组织化学法染色。选用CK5(细胞角蛋白-5)、SMA(肌动蛋白)、p63(肿瘤抑制基因)、CD10(普通急性淋巴母细胞性白血病抗原)、CK34βE12(肌动蛋白)作为一抗,一抗购自中山金桥生物技术有限公司。运用SP三步法法进行染色。将片子脱蜡到水化,用PBS浸洗,置于柠檬酸的缓冲液中,放入

色的强度两个指标判断阳性等级。按染色的显色的强弱分成:棕色、棕黄色、黄色、无色。依次规定计分为3、2、1、0;依据阳性的细胞数量占同种细胞的比分成: 0、小于1/3、1/3到2/3之间、大于2/3, 分别计分为0、1、2、3。将两种指标的计分相加得和,确定总和为0分是阴性、总和是2分的为弱的程度的阳性、3到4分之间的为适中程度的阳性、5到6分的为强阳性。1.3 统计学方法

本实验以 SPSS11.5 软件进行统计分析,采用χ2检验和 Ridit 分析,P≤0.05 为差异有统计学意义。

龄在30到74岁之间,中位年龄为43岁。单独/复合的症状有疼痛现象的有4例、乳腺有肿块的患者40例、乳头出现溢液的患者有8例。病人的病程时间从7天到10年不等,中位病程为10个月。病变的发生部位:

2 结果

50例IDPN中,只有IDPoma出现的患者25例,另外2例伴有AIDPoma、5例伴有IDPC和AIDPoma、一位患者伴有IDPC;

10位患者的是位于“乳晕区”。IDPN个数小于3个的有20例,大于3个的有20例,最大的直径为:0.3~21.0 毫米。5例临床表现资料缺失。

58

Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.2014.07

临床研究

表1: CK5、P63 等在 IDPN 肌上皮的表达情况

抗体SMAP63CD10CK5CK34βE12

-1001216

+01100

++2383022

+++4741812

合计5050505050

2. 2 免疫表型

(1)IDPoma 除了 CD10表达于肌上皮的细胞膜,其余指标均表达于上皮细胞的细胞质。

(2)AIDPoma SMA、p63、CD10在肌上皮中的表达为强阳性。CK5、CK34βE12 在基侧细胞的表达为中性强度。

(3) IDPC在肌上皮的表达中p63、CD10、SMA为强阳性。在基侧细胞的表达中CK5、 CK34βE12为中性强度,见表1。

经过统计结果显示:CK5、SMA 在 IDPN 基侧细胞/肌上皮的表达有显著差异(χ2=12.573, P≤0.05),SMA 相比于CK5较强;SMA 、CK34βE12在 IDPN 的基侧细胞/肌上皮的表达有显著的差异(χ2=25.793, P≤0.05),CK34βE12 相比于SMA较弱。

周围存在比较多的能够充分伸展的 TDLU ,从而确定为而周围型;另外14 例患者定义为亚节段导管与小叶外的终末的导管接合的部分。有5例患者因为出现的乳头状瘤个数多余或等于3个,从而将他们确诊为多发性。

乳腺导管内乳头状瘤的发病率仅仅比乳腺纤维腺瘤和乳腺癌稍低。乳腺导管内的乳头样瘤这种疾病发生发展的原因尚不是很明确,多数的学者认为是与雌性激素水平的升高或者相对升高有关。由于过分的雌激素刺激,引起乳管的扩张,导致上皮细胞的增生,形成乳管内乳头肿瘤。主要的临床表现有乳腺肿块及乳头溢液这两种。现在的主要检查手段有以下几种:镜检、超声检测及细胞检测等。但以组织学的检测为主。手术切除为该病的主要治疗方法。因发病原因不明没有有效的预防手段,只能通过自身的检查来保

变的具有特异性的蛋白。在本实验中运用免疫组化方法检测出SMA和 CK5在 IDPN 基侧细胞/肌上皮的免疫组化染色结果有明显的差异(χ2=12.573, P≤0.05),SMA 相比于CK5较强;SMA 、CK34βE12在 IDPN 的基侧细胞/肌上皮的表达水平有显著的差异(χ2=25.793, P≤0.05),CK34βE12 相比于SMA较弱。

综上所述,IDPN是一组良性恶性程度不同的病变,其发病的原因还不明确,只能通过HE及免疫组化的方法进行诊断。由实验结果我们可以看出组织HE染色的形态和免疫组化染色都有差异,所以诊断IDPN时应采用HE染色和免疫组化染色相结合标准进行诊断。

3 讨论

依据世界卫生组织乳腺肿瘤组织学分类(2003)中关于 IDPN 的分型定义到现在仍然还存在着分歧,但是大多数的病理学的专家都接受了这一分类方法。本实验一共50 例患者。他们的病理相似的特点有:在扩大的导管中或则小管内部的乳头样的病变形态,这些病变中含有纤维-脉管的中心,覆盖在轴心上方的是上皮,这些一起形成了双层的构型,并没有无显著的异型性。乳头状瘤可能产生在乳腺的导管系统的任何一个部位。型的乳头样瘤多发生在大导管的系统中,通常发生的位置在乳晕的下方。20例患者确定为型;12 例患者的肿瘤在TDLU 里产生、

参考文献

[1]TavassoliF A,DevileeP.World Health Organization classification of tumors.Pathology And Genetics,tumorsof the breastand female genital organs [M].Lyon:IARC Press,2003:76-80.

[2]李小静,杨菊,路璐等.乳腺导管内乳头状肿瘤的免疫表型分析[J].中国临床医学,2013 (2): 213-215.

[3]刘赫,姜玉新,戴晴等.超声造影对乳腺导管内乳头状瘤的诊断价值[J].协和医学杂志,2014,5(1):31-34.

证健康。

实验结果显示,HE染色是判断细胞形态的基础,但HE染色会出现一定的误差导致不能准确判断结果,免疫组化方法就成了另一个必要的检测工具。本实验就通过HE和免疫组化相结合的方法来确定此病的发生及治疗的手段。免疫组织化学方法是通过相关蛋白的特异性表达,来检测此蛋白在不同组织中的表达水平。SMA(肌动蛋白)是一种常见的肌肉上皮的标志物;P63是一种肿瘤的抑制基因,在基底细胞中有表达;CD10也同样会表达于肌肉的上皮细胞,有实验证明CD10也存在于非造血的组织中。CK5及CK34βE12时常见的表达于乳腺组织上皮病

Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.2014.07

59

因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容

Copyright © 2019- xiaozhentang.com 版权所有 湘ICP备2023022495号-4

违法及侵权请联系:TEL:199 1889 7713 E-MAIL:2724546146@qq.com

本站由北京市万商天勤律师事务所王兴未律师提供法律服务