专题5 DNA和蛋白质技术

专题5 DNA和蛋白质技术

第Ⅰ卷 选择题 (共56分)

一、单选题（2分×20=40分）。

1.DNA粗提取实验中有三次过滤：

⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 ⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液 ⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液 以上三次过滤分别为了获得（ ） A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液 B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液 C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNA D含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液 2. 洗涤剂能够瓦解（ ），但对DNA没有影响。§1 A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质 3. 在沸水浴的条件下，DNA遇（ ）会被染成蓝色。§1

A.斐林试剂 B.苏丹Ⅲ染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺 4．在DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（ ）

A.不易破碎 B.减少提取过程中DNA的损失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷 5．DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（ ），静置2—3min，溶液中会出现白 色丝状物。§1

A.0．9%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液 C.质量分数15%的HCl D.体积分数为95%的酒精溶液 6. 以血液为实验材料时，需要向血液中加入（ ），防止血液凝固。 A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红 7. 在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ）§1 A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解杂质的速度

C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出 D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出 8.在一个密闭的容器中，利用PCR技术用含有同位素13C的脱氧核苷酸合成一个DNA分子，然后再加入普通的含12C的脱氧核苷酸，经n次循环后，所得DNA分子中含12C的脱氧核苷酸链数与含13C的脱氧核苷酸链数之比是（ ） A.2n：1 B.（2n-2）：n C.（2n-2）：2 D.（2n-1）：1

9. 具有x个碱基对的一个DNA分子片段含有m个腺嘌呤，该片段利用PCR技术完成了第n个循环后需要多少个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸？（ ） A.（2n-1）（x-m ) B.2n(x-m) C. （2n-1）(x/2-m) D.2n(x/2-m)

10. 下列关于DNA复制过程的正确顺序是（ ）§2

①互补碱基对之间氢键断裂 ②互补碱基对之间形成氢键 ③DNA分子在解旋酶的作用下解旋

④以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对 ⑤子链与母链盘旋成双螺旋状结构

A ①③④②⑤ B ①④②⑤③ C ①③⑤④② D ③①④②⑤ 11. 实验室内模拟生物体DNA的复制必需的一组条件是（ ）

①酶 ②游离的脱氧核苷酸 ③ATP④DN分子⑤mRNA⑥tRNA ⑦适宜的温度 ⑧适宜的酸碱度

1

A ①②③④⑤⑥ B ②③④⑤⑥⑦ C ②③④⑤⑦⑧ D ①②③④⑦⑧

12. DNA的合成方向总是（ ）延伸。

A从DNA分子的左端向右端 B从DNA分子的右端向左端

，，，，

C从子链的5端向3端 D从子链的3端向5端

13. 在PCR过程中，双链DNA解聚为单链、引物与单链结合及形成新的子链所需要的大致

温度顺序依次是（ ）

A.72℃ 50℃ 90℃ B.90℃ 50℃ 72℃ C.50 ℃ 72℃ 90℃ D.50℃ 90℃ 72℃ 14. DNA分子经PCR反应循环一次后，新合成的那条子链的脱氧核苷酸的序列应与（ ） A模板母链相同 B模板母链的互补链相同 C两条模板母链相同 D两条模板母链都不相同 15. 凝胶色谱法是根据蛋白质（ ）分离蛋白质的有效方法。

A对其他分子的亲和力 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度的大小 16. 缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度

17. 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。 A相同 B相反 C相对 D相向 18. 血液由血浆和各种血细胞组成，其中（ ）的含量最多。 A白细胞 B血小板 C红细胞 D淋巴细胞 19. 血红蛋白因含有（ ）而呈红色

A. O2 B. CO C. CO2 D.血红素. 20. 血红蛋白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显 看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（ ） A无色透明的甲苯层 B脂溶性物质的沉淀层 C血红蛋白的水溶液 D其他杂质的暗红色沉淀物

二、多选题（4分× 4=16分）。

22.在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用到的药品的浓度

及其名称是（ ）

A. 2mol/LNaCl溶液 B.0.14mol/LNaCl溶液 C.体积分数为95%的酒精溶液 D. 0.04mol/LNaCl溶液 23. 关于DNA的粗提取与鉴定实验的表达哪项是正确的（ ） A. 离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质 B. 离心沉淀的血细胞中加水是为了提取DNA C.向溶解的DNA烧杯中加蒸馏水是漂洗DNA

D. NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L时，DNA溶解

29. 用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量的大的蛋白质（ ）

A路程较长 B路程较短 C移动速度较慢 D 移动速度较快 30. 蛋白质提取和分离一般分为哪几步（ ）

A．样品处理 B．凝胶色谱操作 C．粗分离 D．SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 E．纯化 F．纯度鉴定

第二卷非选择题

三、非选择题（共44分）

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31. 粗提取DNA的原理是 ，纯化粗提 取的DNA的原理是 ；在制备鸡血细胞液 的过程中，加入的抗凝剂是 。

32. 填写DNA粗提取实验完成下列实验操作时所用试剂。 ⑴提取鸡血细胞中核物质 ⑵溶解核内DNA：

⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA ⑷DNA粘稠物的再溶解

⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物 ⑹DNA的鉴定

33. .关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：

⑴鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细 胞数目较多，可以提供丰富的 。

⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 。

⑶生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后， 结果是 ，这是因为这些动物和人一样，成熟的红细胞中 ， 若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行。这是因为 。

⑷若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，使组织细胞更易分离。

34. PCR技术是把某一DNA片段在实验条件下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用这种技 术能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或者DNA分子片段，“人类基因组计划”的研究中 常用到这种技术。请结合有关知识，回答有关此技术的一些问题：

⑴PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是： ⑵. PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供： 、分别于两条模板

链结合的 ，四种 ，耐热

的 ，同时通过控制 使 DNA复制载体外反复进行。

35．将大肠杆菌置于含15N的培养基上培养。这样，后代大肠杆菌细胞中的DNA双链均被15N标 记。然后将被15N标记的大肠杆菌作为亲代转到普通培养基中，繁殖两代。亲代、第一代、第 二代大肠杆菌DNA的状况如图所示。

⑴第一代大肠杆菌DNA贮存的遗传信息与亲代大肠杆菌DNA贮存的遗传信息完全相同的原 因是 。

⑵如果将第二代大肠杆菌的DNA分子总量作为整体1，其中，带有15N的第二代大肠杆菌 DNA分子约占总量的 %。

⑶如果将第二代大肠杆菌的DNA含量作为整体1，其中含15N标记的第二代大肠杆菌的DNA 含量（脱氧核苷酸单链）约占总量的 %

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36. 红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：

（1）血红蛋白提取和分离的程度可分为四步：______、______、______和______。

（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是__________________。

②以上所述的过程即是样品处理，它包括______、______、收集血红蛋白溶液。 （3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是__________________。

②透析的原理是______________________________。

（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

①样品纯化的目的是______________________________。

②血红蛋白有什么特点？______________________________。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？______________________________________________________。

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专题5 DNA和蛋白质技术答案

1 A B 2 B B 3 D C 4 B D 5 D C 6 C 7 C 8 D 9 A 10 11 12 13 14 D D C B B 15 B 30 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 ABC ABD BD ACEF

1． 解析:用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤得相继处理，方能得到较纯的DNA。DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低，成丝状粘稠物，可经过滤留在纱布上。

30．解析：蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。B中凝胶色谱操作及D中SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术

31．DNA溶解于NaCl溶液，但在不同浓度的NaCl溶液中DNA的溶解度不同；DNA不溶于冷

酒精溶液，但细胞中的某些物质溶于酒精溶液；柠檬酸钠；草酸钾

32．⑴蒸馏水 ⑵2mol/LNaCl溶液 ⑶蒸馏水 ⑷2mol/LNaCl溶液 ⑸冷却的95%的酒精 ⑹二苯胺

33．⑴含细胞核；红；DNA ⑵鸡血细胞液中DNA相对含量⑶很难提取到DNA；无细胞核；肝 细胞有细胞核⑷研磨

34．⑴DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对 ⑵DNA模板；两种引物；脱氧核苷酸；DNA聚合酶；温度

35．答案：⑴它们均是以亲代15N标记的DNA双链的每条链为模板，通过碱基互补配对原则合成 的⑵50 ⑶25

36.（1）样品处理；粗分离；纯化；纯度鉴定

（2）①防止血液凝固②红细胞的洗涤，血红蛋白的释放 （3）①去除分子质量较小的杂质

②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内 （4）①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去 ②血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时，可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液；这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。

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