邻菲罗啉（1,10-Phenanthroline hydrate）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下：
在pH=1.5～9.5的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下：
此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+：
4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+
测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。
实验步骤：
吸取已稀释的试液10.0mL于50mL容量瓶中，加入5.0mL HAc～NaAc缓冲液、2.5mL盐酸羟胺（用于还原Fe3+，若无Fe3+可不加）、5.0mL邻菲罗啉溶液，混合比例为：试样:缓冲液:盐酸羟胺:邻菲罗啉=1:1:0.5:1。然后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min，于分光光度计上测定吸光度。
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