荧光定量PCR法检测儿童肺炎支原体感染的分析

荧光定量ＰＣＲ法检测儿童肺炎支原体感染的分析

作者：马 勇 丁国英

来源：《中国实用医药》2008年第22期

【摘要】 目的探讨呼吸道感染患儿肺炎支原体的感染情况。 方法荧光定量PCR法。 结果肺炎支原体的总检出率为29．1%，30 d~1岁组，1~3岁组、>3岁组的患儿肺炎支原体感染率明显高于

【关键词】肺炎支原体；呼吸道感染；荧光定量PCR法

肺炎支原体（M.pneumoniae）是儿童和青少年呼吸道感染最常见的病因之一，由它引起的肺炎称为肺炎支原体肺炎，也称作原发性非典型肺炎。本病是儿科常见病，多发病。笔者应用荧光定量PCR（Fluorogenic Quantitative PCR,FQ-PCR）法对560例呼吸道感染患儿进行了肺炎支原体检测，结果报告如下。

1 对象和方法

1．1 对象 河南省信阳职业技术学院附属医院2006年12月至2007年11月儿科住院的呼吸道感染患者，共560例。其中，男340例，女220例。年龄：分为4组，3岁111例。发病季节：春季（3~5月）126例，夏季(6~8月)例，秋季(9~11月)133例，冬季(12~2月)237例。所有检测对象检测前3 d均未用抗生素治疗。

1．2 标本采集 血液标本60例：抽取1 ml静脉血于含有EDTA抗凝剂的无菌试管中，混匀送检。痰标本500例：吸痰器吸取1~3 ml呼吸道声门以下部位分泌物，置于内含2~4 ml生理盐水的无菌专用管中，立即送检。

1．3 仪器与试剂 仪器为中山大学达安基因股份有限公司的全自动荧光定量PCR分析仪。肺炎支原体PCR荧光检测试剂也由中山大学达安基因股份有限公司提供。 1．4 检测 严格按照试剂说明书要求的操作规程上机检测。 1．5 统计学方法 组间阳性率比较采用 χ2 检验。

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2 结果

2．1 肺炎支原体（MP）荧光定量PCR检测结果 560例儿童患者中，MP检测阳性163例，总检出率为29．1%。其中，340例男患者中阳性101例，阳性率为29．7%。220例女患者中阳性63例，阳性率为28．6%。男女阳性率比较， P >0．05，差异无统计学意义。 2．2 不同年龄组MP感染的阳性率 见表1。

2．3 不同类型标本MP检测的阳性率 见表2。

2．4 不同季节MP感染的阳性率比较 见表3。 3 讨论

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MP感染广泛存在，每3~4年流行1次，支原体肺炎平均占住院肺炎的10%~20%，流行期可占30%[1]。本文的MP感染阳性率为29．1%（表1），提醒临床医生在诊断儿童呼吸道感染时应检测MP。另据文献，支原体肺炎主要经飞沫感染，大多发生于夏末秋初，但一年中任何时间都可发生[2]。与本文表3的检测结果基本一致，虽然各季节MP感染阳性率比较差异无统计学意义，但秋季和夏季的阳性率略高分别为33．1%和31．3%。从年龄来看，MP随着年龄的增长感染率也逐渐增高（表1），>3岁的患者，阳性率高达55．8%。[3]。方便了临床上应用，在疾病的基因诊断中有广阔的应用前景。肺炎支原体是儿童呼吸道感染最常见的病原体。严重危害儿童的身体健康，采用特异性、敏感性高的检测技术快速检测MP，可做到早诊断、早预防、早治疗。 参考文献

［1］孙向阳，闫临漪，高希兰.小儿支原体肺炎外并发症42例分析.现代诊断与治疗，1999，10：3.

［2］ 陆德源.医学微生物学.人民卫生出版社，2005：168-169.

［3］ 陈文学，邹学森，陈岳青.荧光定量PCR技术在肿瘤研究中的应用.基因诊断，2004，3（1）：1-2.