２０１７年１月第２期 １３５ ＨＰＬＣ法在测定当归片中阿魏酸含量中的应用 陈卓君 （广东省湛江卫生学校摘广东 湛江５２４０３７） 要：目的：利用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）对当归片的含量进行有效测定。方法：流动相是乙腈一浓度为０．０８５％的磷酸溶液，其中比例为 １７：８３；色谱柱是Ｚｏｍｂｉ Ｃ１８，其对应的参数为５ ，规格为２５０ｒａｍ ｘ４．６ｒａｍ；流速是１．Ｏｍ￣ｍｉｎ。结果：阿魏酸含量在范围９．７２４￣ｇ／ｍｌ至５８． ３４４ ｇ／ｒｎｌ时，其与峰面积积分值之间的线性关系较好。平均回收率是９９．３％，并且ＲＳＤ的值是９９．６％。结论本方法可以有效控制当归片的 质量，具有良好的重现性，并且准确高、操作简便。 关键词：高效液相色谱法；当归片剂；阿魏酸 中图分类号：１１９２７．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—０９７９（２０１７）０２—０１３５一Ｏ１ 当归片是一种浸膏片，主要由当归饮片经过加工处理形成，不仅 １．２．８加样回收试验：采用精密吸取方式来获取批号相同的４份样 具有调经止痛功能，而且还具有补血活血功能，作为一种临床常用药， 品，其参数为２．６２２ｍｇ／ｇ，向所有的样品当中添加对照品溶液ｌｍｌ，接 主要治理血虚引发的月经不调、面色萎黄以及经闭痛经等…。当归的 主要成分包括阿魏酸，该成分不仅可以促进体液免疫，而且还可以促 进细胞免疫，为了对产品的质量进行有效控制，本文利用高效液相色 谱法对阿魏酸含量进行了有效测定，现报道如下。 １材料与方法 １．１仪器与方法：高效液相色谱仪，其型号为ＬＣ一２０１０ＣＨＴ；普利赛斯 电子分析天平，其型号为９２ＳＭ一２０２Ａ；高灵敏度紫外检测器，其型号 为ｕＶ ｄｅｔｅｃ￣ｒ；超声波清洗器，其型号为ＫＱ一５００ 。为了找到最佳 含量，本文采用了三家公司生产的当归片，对应的批号分别是 ２００９０２０１、０９０４１１、０９０５０２，其中前者产于河南怀庆药业有限公司，批 号位于中间的当归片产于新乡中杰药业有限公司，后者产于河南龙都 药业有限公司，重蒸馏水是水，分析纯是磷酸，色谱纯是乙腈。 １．２溶液的制备 １．２．１对照品溶液制备：采用精密称量方法来对阿魏酸对照品进行有 效称取，确保其重量为２４．３ｌｎｉｇ，然后将其放人量程为ｌＯＯｍｌ容量瓶 当中，接下来向其加入７０％的甲醇溶液来达到稀释的效果，直至达到 刻度，最后将其摇匀，当作对照品储备液 。除此之外，还需要采用精 密量取的方式来获取２ｍｌ的储备液，将其放入量程为２５ｍｌ容量瓶当 中，同样将甲醇溶液加入其中直至达到刻度，最后将其摇匀，当作对照 品储备液。 １．２．２供试品溶液制备：首先取２Ｏ片本品，将其糖衣去除，并对其研 细操作，取其中０．３ｇ左右，经过精密称定，放置于带有活塞的锥形瓶 当中，采用精密加入的方式向其添加２５ｍｌ浓度为７０％的甲醇溶液，密 塞锥形瓶，并称量其现有重量，给予时长为２０ｍｉｎ的超声处理，处理结 束以后放置冷却，再次对其进行称量操作，继续加入浓度为７０％的甲 醇溶液，以此来填补减少的重量，最后将其摇匀并进行过滤处理，该溶 液将作为供试品溶液。 １．２．３色谱条件：流动相条件：乙腈一浓度为０．０８５％的磷酸溶液，其 中比例为１７：８３；色谱柱条件：Ｚｏ￣ａｘｌ Ｃ１８，其对应的参数为５ ｍ，规格 为２５０ｍｍ×４．６ｒａｍ；流速条件：每分钟１．Ｏｍｌ；柱温条件：３５℃；进样量 条件：ｌＯｌＬ。要求按照阿魏酸峰完成相应计算，理论板数必须＞ ５０００，并且分离度不可以＜１．５。 １．２．４线性关系考察：采用精密量取的方法来量取４组对照品储备 液，分别为１ ｍｌ、２ ｍｌ、３ ｍｌ、４ ｍｌ，接下来将４组储备液均放置到容量为 ２５ｍｌ的容量瓶当中，添加２５ｍ］浓度为７０％的甲醇溶液，并且将溶液 摇匀，在满足以上色谱条件的前提下，从每一个容量瓶中精密量取 １０ ｌ完成进样，采取峰面积Ｚ对对照品进样量Ｋ作线性回归计算。 当ｍ＝６时，有方程成立，其中ｒ的值为０．９９９９。 １．２．５精密度试验：采用精密吸取方式来获取阿魏酸对照品溶液，其 浓度是１９．４４８￣ｇ／ｍｌ，对其进行连续４次的测定。 １．２．６重复性试验：称取批号相同的４份样品，按照上述制备方法完 成制备任务，并且采用色谱条件测定方法来对阿魏酸含量进行有效 测定。 １．２．７稳定性试验：称取批号相同的试品溶液，依据本文中的色谱条 件，设定测量时间间隔为１ｈ，从０～４ｈ。 下来按照供试品溶液的制备方法来完成溶液的制备，与此同时对其中 的阿魏酸含量进行测定，除此之外，还需要完成回收率的计算。 ２结果 ２．１线性关系考察结果：试验结果表明，当阿魏酸含量在范围９．７２４～ ５８．３４４￣ｇ／ｍｌ当中时，其与峰面积积分值之间的线性关系较好。 ２．２精密度试验结果：试验结果表明，平均峰面积是１０２７８０５，并且 ＲＳＤ的值是０．７８％。 ２．３重复性试验结果：阿魏酸含量的平均测定结果是０．６１５ｍｇ／片，对 应的ＲＳＤ的值是１．０３％。 ２．４稳定性试验结果：试验结果表明，供试品容易的稳定时长为４ｈ，平 均峰面积值是１４４８７２６，对应的ＲＳＤ的值是１．３％。 ２．５加样回收试验结果：回收率的测定结果见表１。 表１回收率的测定结果 ２．６样品含量的测定结果：本文选取３批样品进行含量的测定，结果 见表２。 表２样品含量的测定结果 批号 含量（ｍ 片） ２００９０２０１ ０．６４８ ０９０４１１ ０．６１５ ０９０５０２ ０．５７９ ３讨论 本文在设置流动相条件时，选取乙腈一浓度为０．０８５％的磷酸溶 液，对其比例进行调试，当其比例为１７：８３时，分离度以及峰形都比较 满意，并且没有出现杂质峰，所以该条件可以作为流动相。 当归片是一种单味药制剂，本文选取其处方辅料，制定了相应的 样品溶液制备方法，同时还制备了对照品溶液。按照设置好的色谱条 件来对其进行测定，从测定结果中发现阿魏酸的测定不会受到阴性溶 液的影响。 参考文献 ［１］张静，李洪，高玉梅，等．ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定当归片中阿魏酸的含量 ［Ｊ］．安徽农业科学，２０１１，３９（１４）：８２６８—８２６９． ［２］辛继跃，邓强华．ＨＰＬＣ法测定当归南枣片中阿魏酸的含量［Ｊ］．江 西中医药，２０１１，４２（８）：６１—６２． ［３］孔娟．ＨＰＬＣ法测定银星养脑片中阿魏酸的含量［Ｊ］．中国现代药 物应用，２０１１，５（２１）：６８—６９． ２０１６年１１月２３日收稿
