４３３２ 吉林医学２０１１年７月第３２卷第２１期 脑损伤并胫骨骨折大鼠血清中神经生长因子的表达意义 熊健斌，孙宏志，彭伟秋（广西柳州市人民医院，广西柳州５４５０００） 【摘要】目的：探讨脑损伤并胫骨骨折大鼠血清中神经生长因子（ＮＧＦ）的水平变化及其与预后的关系。方法：①实验分组：雄性 Ｗｉｓｔａｒ大鼠６４只，体质量４５０～５５０ ｇ，随机数字表法分为单纯骨折组（ｎ＝３２），脑损伤合并骨折组（ｎ＝３２）；②实验方法：麻醉后显露 大鼠右颅顶骨，中线旁２ ｍｍ处开直径５ ｍｍ骨窗，液压打击致中度脑损伤，并制备大鼠胫骨骨折模型，其中单纯骨折组头部只做颅骨 开窗。采用双抗体夹心一ＥＬＩＳＡ法进行伤后第ｌ天、７天、１４天及２ｌ天血清ＮＧＦ的检测，并对混合损伤组大鼠的骨折临床愈合时间与其伤 后第１天的血清ＮＧＦ水平进行相关分析。结果：混合损伤组的骨折临床愈合时间（６２．８８±５．９９）ｄ比单纯组（８２．４７±３．０７）ｄ的短（户一 １６．４７３，Ｐ＜０．００１），而且混合损伤组大鼠的骨折临床愈合时间与它们伤后第１Ｘ的血清ＮＧＦ水平高度负相关（Ｐｅａｒｓｏｎ相关系数：一 ０．９６６，Ｐ＜Ｏ．００１）。结论：ＮＧＦ在合并脑外伤的骨折大鼠血清中呈高表达，并与患者的预后高度相关。 ｆ关键词】胫骨骨折；大鼠；神经生长因子；脑外伤；预后 在临床工作中，观察到伴有颅脑损伤的骨折患者，往往可 以见到大量的骨痂过度生长，甚至肌肉中出现异位骨化，骨折愈 碘伏再消毒。单纯骨折组头部只做颅骨开窗。术毕分笼饲养。 １．２．３ ＮＧＦ的检测：所有大鼠均在伤后第ｌ天、７天、１４天及２１ 合明显快于没有中枢神经损伤的骨折患者。而神经因素在骨折愈 合过程中具有重要作用，它们可以调节骨折修复过程中的多种反 应，影响细胞增殖、迁移和释放。其中，神经生长因子（ＮＧＦ） 天，清晨空腹，尾部静脉血５ ｍｌ，采血后室温离心收集上清 液，一７０℃冰箱保存。采用双抗体夹心．ＥＬＩＳＡ法进行ＮＧＦ检 测，严格按说明书操作。 对正常骨组织的神经维持有重要作用，对骨折的修复通过神经系 统起促进作用 ］。本次研究以大鼠对象，设立脑外伤合并胫骨骨 折的模型，通过对比研究了解ＮＧＦ在合并脑外伤的胫骨骨折中的 作用。 １．２．４术后观察：以患肢无肿胀，行走无跛行，ｘ线照片显示骨 折线模糊，有连续性骨痂通过骨折线，为标准，判断骨折临床愈 合，并记录骨折临床愈合时间。 １．３统计学处理：用ＳＰＳＳ １３．０统计软件，在检验水准０ｌ＝Ｏ．０５的 基础上，用重复测量资料的方差分析ＮＧＦ在两组患者血清中的表 １资料与方法 １．１ 一般资料：随机选取清洁级雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠６４只，体质量 ４５０ ５５０ ｇ，月龄３ ４个月，由广西医科大学实验动物中心提 供。 １．２方法 ２结果 达，并对混合损伤组患者的骨折临床愈合时间与伤后第１天的血 清ＮＧＦ水平进行两变量的相关分析。 实验动物数量分析纳入大鼠６４只，均进人结果分析，无脱 落。 １．２．１干预分组：将６４只大鼠按随机数字表法分为单纯骨折组 （ｎ＝３２），脑损伤合并骨折组（ｎ＝３２）。 １．２．２模型制备：术前所有大鼠禁食，称质量，经（１ ｍｌ／ 各组在各个时间点ＮＧＦ血清水平和骨折一生＿涑愈合时问，见 表１。其中，混合损伤组的骨折临床愈合时间（６１．８８±５．９９）ｄ要 比单纯组（８４．４７±３．０７）ｄ的要短（ｆ＝一９．４２５，Ｐ＜０．００１），而 ｋｇ）腹腔内注射麻醉后，常规去毛、备皮、碘伏消毒，显露右 颅顶骨，中线旁２ ｍｍ￣ｔｌ：开直径５ ｍｍ骨窗，液压打击致中度脑损 伤。复苏后，沿胫骨前外侧钝性分离进人、达胫骨干，在胫骨骨 干中ｌ／３段用摆锯锯断成横形骨折，以直径Ｉ ｍｍ克氏针作逆行髓 内固定，经查骨折固定牢固后，生理盐水冲洗伤口，关闭伤口， 表１两组大鼠的血清ＮＧＦ水平和临床愈合时间（ｉ±Ｓ） 且混合损伤组大鼠的骨折临床愈合时间与它们伤后第ｌ天的血清 ＮＧＦ水平高度负相关（相关系数—一Ｏ．８２６，Ｐ＜Ｏ．００１），也就是 伴有脑外伤的胫骨干骨折大鼠伤后第ｌ天的血清ＮＧＦ水平越高， 它们的骨折临床愈合时间就越短。 ３讨论 蛋白一１的表达上调有关。因为在神经生长因子基因上有ＡＰ－ｌ的结 合位点，而ＡＰ一１作为转录因子与许多基因的ＡＰ．１结合位点（包 括ＮＧＦ）或佛波脂反应序列结合，影响晚期靶基因的表达。随着 颅脑外伤病情的改善，刺激ＡＰ一１的应激因素渐消退，所以血清 ＮＧＦ水平也渐回落 】。 生长因子促进肌肉再生，促进心肌、神经损伤修复的功能提 示力生长因子可能是机体自我损伤修复的机制之。在本次研究中 发现，伴有脑外伤的大鼠在胫骨骨折后，与单纯脑外伤和骨折的 相比，血清ＮＧＦ第１天开始明显升高，伤后第ｌ４天达高峰，第２１ 天已降至第７天的水平，而且各测量时间点的ＮＧＦ水平均比同期 的单纯骨折患者的高。这提示了颅脑损伤导致了血清ＮＧＦ水平表 达的增加。出现这种变化趋势，可能与脑外伤后异源二聚体激活 在本次研究中，尚观察到了伴有脑外伤的大鼠，骨折临床愈 合时间明显比单纯骨折者的要短。之前也有学者报道，伴有脑外 伤的骨折的骨折愈合速度明显加快。而且Ｈａｓａｎ等发现，ＮＧＦ可 吉林医学２０１ １年７月第３２卷第２ｌ期 ４３３３ 在伤口愈合中合成，并且新生动物中可见ＮＧＦ高表达，提示ＮＧＦ ４参考文献 参与了创伤愈合过程 。伴有脑外伤的大鼠骨折临床愈合时间明 ［１】刘宇鹏，赵德伟，吕德成．神经生长因子在大鼠胫骨骨折中的表达 显缩短，这可能与它们的血清ＮＧＦ水平在伤后增加要比单纯骨折 ［Ｊ］．中国临床康复，２００６，１０（１７）：１０７． 者的多有关。因为在本次研究中，也同时观察到了单纯组患者血 ［２】Ｅｒｉｋｓｓｏｎ Ｍ，Ｔａｓｋｉｎｅｎ Ｍ，Ｌｅｐｐａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｍｉｔｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ 清ＮＧＦ水平的变化较为稳定，而混合损伤组的则较大。而且愈合 ｋｉｎａｓｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃ—Ｊｕｎ ａｎｄ ｃ—Ｆｏｓ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ 时间与伤后第１天的血清ＮＧＦ水平高度相关，提示了早期提高血 ｎｅｕｒｏｎａｌ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｂｕｔ ｎｏｔ ｆｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｓｔｒｅｓｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ＰＣＩ２ 清ＮＧＦ水平可以促进骨折愈合，这与Ｓｃｈｕｉｊｅｒｓ等认为的局部注射 ｃｅｌｌｓ［Ｊ］－Ｊ Ｃｅｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００７，２１０（２）：５３８． ＮＧＦ可促进骨折愈合相似 ｌ。 【３］Ｈａｓａｎ Ｗ，Ｚｈａｎｇ Ｒ，Ｌｊｎ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ ｅｘｐｒｅｅｓｉｏｎ ｏｆＮＧＦ ａｎｄ 骨折患者如果能加快临床愈合时间，这对于减少患者由 ａ—ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｏｃｔｉｎ ｍＲＮＡ ｎａｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｃｕｔａｍｅｏｕｓ ｗｏｕｎｄｔｉｓｓｕｅ 于长期卧床引起的并发症是有利的。由于ＮＧＦ在合并有脑外伤 ｏｆｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ａｎｄ ａｄｕｋ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｔｉｓｓｕｅ Ｒｅｓ，２０００，３００（１）：９７． 的骨折大鼠血中呈高表达和表现出一定的时间规律性，并与骨 ［４］Ｓｃｈｕｉｊｅｒｓ ＪＡ，Ｗａｒｄ ＡＲ，Ｇｒｉｌｌｓ ＢＬ．Ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｓ 折临床愈合时间密切相关。所以，如何在合并有脑外伤的骨折 ｆｒａｃｔｕｒｅ ｈｅａｌｉｎｇ ｉｎ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ｐａｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ 患者中应用ＮＧＦ，更好地促进骨折愈合，将有待于进一步的研 ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｉｃａｌ ｓｏｃｉｅｔｙ，２００５，３６（１）：９８． 究。 ［收稿日期：２０１１－０４—０７编校：苏建东］ 复发性成熟性卵巢畸胎瘤３６例临床及病理分析 杨利琴（生产建设兵团农十四师师部综合门诊部，和田８４８０００） ［摘要】目的：分析３６例复发性卵巢畸胎瘤患者的临床及病理特征。方法：回顾性分析１０年来３６例行开腹手术治疗的复发性卵巢成 熟性畸胎瘤患者的临床特点及临床病理特征并与同期手术的４Ｏ例未复发者（对照组）进行比较。结果：复发组的患者与对照组相比， 发病年龄小、双侧或多房的囊肿更多见。但在孕产次、囊肿大小及术中是否破裂数等方面两组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。 复发组的病理类型分析与对照组之间比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：年轻的患者及双侧或多房的畸胎瘤易复发，应加强 随诊。复发性卵巢成熟性畸胎瘤以卵巢成熟性囊性畸胎瘤多见，恶变者较少。 【关键词】复发性卵巢成熟性畸胎瘤；手术；临床特点；病理分析 卵巢成熟畸胎瘤是育龄期妇女一种最为常见的卵巢良性肿 除肿瘤，卵巢创面电凝止血，包被缝合卵巢。标本均采用中性甲 瘤，约占全部卵巢肿瘤的１５％～２０％，但复发率低，临床上对此 醛溶液固定、常规石蜡切片，ＨＥ染色及特殊染色。 研究较为少见。笔者对１０年来的复发性卵巢成熟性畸胎瘤的临床 １．３统计学处理：应用ＳＰＳＳ １５．０软件，对计量资料作啦验，对 资料作临床及病理分析，现报告如下。 计数资料作ｘ 检验，Ｉ２）Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 １资料与方法 ２结果 １．１ 一般资料：选取２００１年１月～２０１０年１２月，在我院确诊为复 ２．１ 临床表现：复发组的发病年龄较对照组小，双侧及多房肿 发性卵巢畸胎瘤而入院行手术治疗的患者３６例，设为复发组。随 瘤的比例较对照组高（Ｐ＜０．０５）。而两组之间的孕产次、肿瘤 机抽取同期手术的未复发者患者４Ｏ例作为对照组。两组手术切除 大小及术中肿瘤破裂率差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），见表ｌ。 标本均送病理检查获得证实。 复发组所有的单侧的患者在初次手术时均进行了对侧卵巢的剖开 １．２ 手术方式：患者手术方案：于卵巢背侧切开卵巢皮质，剔 探查，病理学证实均为阴性。 表１复发组与对照组临床表现的比较 注：与复发组比较，ｑ）Ｐ＜ｏ．０５，②Ｐ＞０．０５ ２．２病理分析：病理学检查显示：卵巢成熟性囊性畸胎瘤（皮 示差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。 脂样囊肿）复发组与对照组分别为：８３．３％（３０／３６）及８０．０％ （３２／４０）；卵巢成熟性囊性畸胎瘤伴神经及脑组织复发组与对 ３讨论 照组分别为：８＿３％（３／３６）及１０．Ｏ％（４／４０）；卵巢成熟性囊性 卵巢成熟畸胎瘤为来源于原始生殖细胞的肿瘤，是最常见的 畸胎瘤伴甲状腺及甲状腺肿成分复发组与对照组分别为：５．６％ 卵巢肿瘤之一，多为良性肿瘤。然而关于卵巢成熟性囊性畸胎瘤 （２／３６）及７．５％（３／４０）；卵巢成熟性囊性畸胎瘤恶性变复发组 复发的问题，目前尚无大规模的病例研究。文献报道的复发率小 与埘照组分别为：２．８％（１／３６）及２．５％（１／４０）。统计学检验显 于４％。Ｌａｋｋｉｓ等的一项＿６年的回顾性研究中，１ｌ８例患者中有４例
