土甘草药理作用研究

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.1

2.2　检测指标本实验结果表明,心衰大鼠模型血清TNF-α、IL-6含量升高,

2.2.1　TNF-α和、IL-6表达的放射免疫法检测于末次灌胃证实了上述观点。提示以TNF-α、IL-6升高为标志的炎症机后禁食12h,麻醉状态下股动脉取血,严格按试剂盒说明书检测制参与了CHF的进程,它们可能通过抑制心脏收缩、促进心肌细血清TNF-α和IL-6。胞的凋亡、促进心室重构等途径参与CHF的发生发展。TNF-α2.2.2　心肌胶原容积分数(CVF)分析取部分左室心肌组织固主要来源于激活的单核巨噬细胞,正常心肌细胞不能产生TNF-定,组织切片行Masson染色,采用Motic6.0数码图象分析系统分α,慢性心衰时在多种因素刺激下,心肌细胞产生大量TNF-α,析CVF,每个标本选取3张切片,每切片观察5个视野,最后计算它一方面可通过激活基质金属蛋白酶(MMPs)和抑制基质金属平均值。蛋白酶抑制剂(TIMPs)表达参与细胞外基质重塑,导致渐进性的2.3　统计学处理所有数据均采用SPSS12.0统计软件包进行左室扩张、左室泵衰竭和心肌细胞收缩功能障碍,另一方面又可分析,数据结果以x󰁡±s,组间比较用单因素方差分析。直接作用于成纤维细胞导致胶原纤维的合成分泌增多[2]。此3　结果外,TNF-α还能促进其他炎性细胞因子IL-6的表达和释放。

见表1。IL-6是一种具有多向性作用的细胞因子,主要由单核细胞、内

皮细胞和成纤维细胞等产生。有研究表明IL-6可增加间质纤

󰁡±s)表1　各组大鼠血清TNF-α、IL-6及CVF结果比较(x

维化和胶原增生,且IL-6水平的增高与Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积密

μg・L-1组别nCVF(%)TNF-α/1L-6/ng・L-1[3]

切相关。心肌胶原是细胞外基质的主要成分,它在维持心脏假手术120.9±0.0343#95.385±2.0923#8.08±0.463#模型　91.255±0.049193.433±4.83418.61±0.87结构和功能方面起重要作用。正常时胶原的生成和降解在体内高剂量100.756±0.0333#△128.849±2.073#△9.26±0.63#△

处于动态平衡状态,病理条件下,胶原的增多或减少都会引起心

低剂量100.944±0.1333160.286±4.830312.9±0.733

室重构及心肌纤维化,加重心衰。心宝丸90.976±0.0523166.867±4.8787313.1±0.823

本实验证明,葶苈生脉方对慢性心力衰竭大鼠血清TNF-　　与模型组比较,3P<0.01;与心宝丸组比较,#P<0.01;高、低剂量组比较,△P<0.01

α、IL-6的表达具有明显的抑制作用,同时调节心肌胶原的代

　　结果显示,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6及心肌CVF较假谢,阻止心室重构,改善心功能,达到治疗CHF的目的。

手术组明显升高(P<0.01);各治疗组血清TNF-α、IL-6及心肌CVF均明显低于模型组(P<0.01);且高剂量组优于低剂量组(P<0.01)。4　讨论

慢性心衰属于祖国医学的胸痹、心悸、怔忡、水肿等病证的范畴。气虚、血瘀、水停为其主要病机,益气活血,强心利水为其主要治则。临床实践证实,葶苈生脉方具有益气、活血、利水之功效,是治疗心力衰竭的有效方药。

大量研究报道炎症细胞因子活化可破坏心脏结构和功能,使

β和I心衰进一步恶化,TNF-α是核心,此外还包括IL-1L-6。

参考文献:[1]　AronowWS・Epidemiology,pathophysiology,prognosis,andtreatment

ofsystolicanddiastolicheartfailure[J].CardiolRev,2006,14(3):

108.

[2]　马永娜,李拥军.肿瘤坏死因子-α和左心肌重构[J].中国介入心

脏病学杂志,2005,13(5):325.

[3]　Yuep,MassieBM,SimposinPC,etal.Cytokineexpressionincreases

innonmyocytesfromratswithpostinfarctionheartfailure[J].AmJ

Physiol,1998,275(1Pt2):250.

土甘草药理作用研究

郭力城,杨东爱,余胜民,黄琳芸,陈少锋

(广西民族医药研究所,广西南宁　530001)

摘要:目的对土甘草水提取物和醇提取物的抗炎、镇痛作用及急性毒性进行研究。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀

法、醋酸扭体法观察土甘草的抗炎、镇痛作用;以土甘草水提物1.57g・ml-1,醇提物2.40g・ml-1,最大剂量40ml・-1

kg分别对小鼠灌胃给药,观察其急性毒性。结果土甘草对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用(P<0.05);对0.7%醋酸所致小鼠扭体反应有明显的抑制作用(P<0.05)。土甘草水提物对小鼠灌胃给药的最大耐受量为62.8g生药・kg-1;醇提物对小鼠灌胃给药的最大耐受量为96.0g生药・kg-1。结论土甘草具有一定的抗炎、镇痛作用;土甘草水提物及醇提取物未出现其它毒性反应。关键词:土甘草;　药理作用;　急性毒性

中图分类号:R284　　文献标识码:B　　文章编号:100820805(2010)01201202

　　壮药土甘草为豆科植物毛果鱼藤DerriseriocarpaHow的干燥根、藤,亦称“鸡血藤”“藤子甘草”等,分布在广西、云南一带。根入药,补血、润肠,用于发烧、胸闷、咳嗽、咽喉痛;藤入药,利尿除湿、镇咳化痰,用于小便涩痛、咳嗽、水肿等。壮族民间常用于咳血、咳嗽等症。至今在国内公开发行期刊中,只有有关其生药

学研究,未见有关土甘草药理毒理学研究资料。为进一步研究开

发和临床应用提供实验依据,本文对其开展抗炎、镇痛的药效作用及急性毒性实验研究。1　材料与仪器

1.1　药物与试剂土甘草药材购自广西靖西县药市并经广西中医学院生药鉴定教研室田辉副教授鉴定为豆科植物毛果鱼藤DerriseriocarpaHow。收稿日期:2009202217;　修订日期:2009206226

基金项目:广西壮族自治区卫生厅重点科研课题(No.200601)土甘草水提取物和乙醇提取物样品由本实验室自制提供。作者简介:郭力城(19772),男(壮族),广西扶绥人,现任广西民族医药研二甲苯为广州新港化工厂生产;阿司匹林片为湖南新汇制药有限究所助理研究员,硕士学位,主要从事民族药新药研究工作.公司生产,批号080101。

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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.1

时珍国医国药2010年第21卷第1期

1.2　动物SPF级昆明种小鼠,18～22g,雌雄兼用,清洁级动物,由广西医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK桂2003-0003。小鼠分性别饲养于空调室内,室温(22±2)℃,湿度(70±5)%,喂标准颗粒饲料,自由饮水和摄食。

1.3　仪器棱光-722型可见分光光度计;FA1004型万分之一电子天平,由上海精密科学仪器有限公司生产。2　方法与结果2.1　二甲苯致小鼠耳肿廓胀实验昆明种小鼠50只,随机分为5组。即空白对照组、阳性对照组(阿司匹林200mg・kg-1)和土甘草高、中、低剂量组。分别灌胃给药1次/d,连续给药4d,末次给药30min后,于小鼠右耳两面涂二甲苯0.05ml致炎,左耳不涂为正常耳;30min后处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,用直径8mm打孔器在同一部位取下耳片,于分析天平上称重,以左右耳片重量差值表示炎性肿胀程度。计算抑制率。抑制率(%)=(空白对照组肿胀度-给药组肿胀度)÷空白组肿胀度×100%。见表1～2。

󰁡±s)表1　土甘草水提取物对小鼠二甲苯致耳廓肿胀的影响(x组别剂量C/g生药・kg-1

空白对照-阿司匹林0.2土甘草低剂量5.0土甘草中剂量10.0土甘草高剂量20.0　　与空白对照组比较,3P<0.01,3

3P

肿胀度m/mg

0.020±0.0040.015±0.00430.013±0.00330.013±0.00630.012±0.0063<0.05;n=103333

抑制率(%)

-25.9933.5933.7937.00󰁡±s)表2　土甘草醇提取物对小鼠二甲苯致耳廓肿胀的影响(x组别剂量C/g生药・kg-1

空白对照-阿司匹林0.2土甘草低剂量7.5土甘草中剂量15.0土甘草高剂量30.0　　与空白对照组比较,3P<0.01,3

3P

肿胀度m/mg

0.020±0.0040.015±0.00430.021±0.0070.015±0.00430.014±0.0053<0.05;n=10

333

抑制率(%)

-25.996.0623.8830.74实验结果显示,土甘草水提取物高、中、低剂量组均对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05),其抑制率均在30%以上,抑制率随剂量的增大而增大,且抗炎抑制率高于阿司匹林;土甘草醇提取物中、高剂量对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用(P<0.05),其中中剂量抑制率低于阿司匹林,而高剂量抗炎抑制率则高于阿司匹林。2.2　小鼠醋酸致痛扭体法实验取健康小鼠50只,雌雄各半,随机分成5组。即空白对照组、阳性对照组(阿司匹林

-1

200mg・kg)和土甘草高、中、低剂量组。每组10只,分别灌胃药物或等量水4d,第4天药后1h各组小鼠均腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2ml/只,观察注射醋酸后10min内小鼠扭体反应的次数。求得扭体反应抑制率。抑制率(%)=(空白组扭体反应次数-给药组扭体反应次数)÷空白组扭体反应次数×100%。见表3～4。

表3　土甘草水提取物扭体法镇痛实验结果(x󰁡±s)

组别剂量C/g生药・kg-1

空白对照-阿司匹林0.2土甘草低剂量5.0土甘草中剂量10.0土甘草高剂量20.0

扭体次数

19.6±10.02.4±2.439.6±6.739.3±6.437.7±8.33

抑制率(%)

-87.76

51.0252.5560.71实验结果显示,土甘草水提取物高、中、低剂量均具有抑制小鼠醋酸扭体反应的作用(P<0.01),其镇痛率低于阿司匹林。抑制率均在50%以上,抑制率随剂量的增大而增大;土甘草醇提取物高、中剂量具有抑制小鼠醋酸扭体反应的作用(P<0.01,P<0.05),其镇痛率低于阿司匹林,抑制率随剂量的增大而增大,以高剂量抑制作用尤为明显。2.3　毒理研究2.3.1　水提物最大耐受量(MTD)测定取土甘草切片,晾干,粉碎成粗粉,加8倍量水,浸泡后加热煮沸提取,冷却后用100目滤布滤过,煮提2次,合并滤液。滤液水浴浓缩。实验时以蒸馏水稀释至1.57g/ml。参考预实验结果,取禁食16h的小鼠20

-1

只,雌雄各半,按1.57g/ml、40ml・kg灌胃给药,于给药后1、24、72h至第7天,每天观察并记录小鼠的体质量、皮肤毛发、眼和粘膜的变化、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等变化及其中毒和

-1

死亡情况。以1.57g・ml,40ml・kg-1土甘草水提物灌胃给药后,小鼠均出现蜷卧少动症状,24h后恢复正常。观察7d,小鼠的行为、进食、皮毛、眼和粘膜、呼吸、四肢活动和体质量均无异常,未出现其它毒性反应。土甘草水提物对小鼠灌胃给药的最大耐受量为62.8g生药・kg-1。土甘草水提物灌胃给药对小鼠体质量的影响结果见表5。2.3.2　醇提物最大耐受量(MTD)测定取土甘草切片,晾干,粉碎成粗粉,置烧瓶中,加8倍量75%乙醇,浸泡后加热回流提取,冷却后用100目滤布滤过,回流提取2次,合并滤液。滤液减压回收乙醇,挥尽乙醇并水浴浓缩。实验时以蒸馏水稀释至2.40g・ml-1。参考预实验结果,取禁食16h的小鼠20只,雌雄各半,按1.57g・ml-1,40ml・kg-1灌胃给药,于给药后1,24,72h至第7天,每天观察并记录小鼠的体质量、皮肤毛发、眼和粘膜的变化、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等及其中毒和死亡情况。以

-1-1

2.40g・ml,40ml・kg土甘草醇提物灌胃给药后,小鼠均出现蜷卧少动症状,24h后恢复正常。观察7d,小鼠的行为、进食、皮毛、眼和粘膜、呼吸、四肢活动和体质量均无异常,未出现其它毒性反应。土甘草醇提物对小鼠灌胃给药的最大耐受量为96.0

-1

g生药・kg。土甘草醇提物灌胃给药对小鼠体质量的影响结果见表5。

󰁡±s)表5　土甘草水提物和醇提物灌胃给药对小鼠体质量的影响(x组别

土甘草水提物土甘草醇提物　　n=20

剂量C/g・kg-1

62.6.0

药前体质量m/g给药后7d体质量m/g19.65±1.1328.13±3.1618.98±1.0124.18±2.60

　　与空白对照组比较,3P<0.01;n=10

表4　土甘草醇提取物扭体法镇痛实验结果(x󰁡±s)

组别

N.S

2.4　统计学分析采用SPSS10.0统计软件分析数据。所得实

验数据表示,采用t检验作组间比较差异显著性,P<0.05和P<0.01认为有显著差异,具有统计学意义。3　讨论

土甘草提取物抗炎实验显示,土甘草水提取物各剂量抗炎效果较好(P<0.01,P<0.05),醇提取物高剂量组也有较好的抗炎作用(P<0.05)。实验中镇痛作用部分证明,土甘草水提取物各剂量及醇提取物高、中剂量均具有抑制小鼠醋酸扭体反应的作用(P<0.01,P<0.05),且抑制率随剂量的增大而增大。以上实验提示,土甘草具有良好的抗炎、镇痛作用。急性毒性实验结果显示,土甘草水提取物及醇提物对小鼠灌胃给药的最大耐受量分别为62.8g生药・kg-1和96.0g生药・kg-1。有关土甘草的抗炎、镇痛机制尚不清楚,有待进一步研究确定。

剂量C/g生药・kg-1

-0.2

5.010.020.0

阿司匹林土甘草低剂量土甘草中剂量土甘草高剂量

扭体次数19.6±10.02.4±2.4313.1±6.311.4±6.7336.1±6.83

3

抑制率(%)

-87.76

33.11.8468.88参考文献:

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西人民出版社,1986:232.

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人民卫生出版社,2002.

　　与空白对照组比较,3P<0.01,3

P<0.03;n=10

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