中国民族民间医药２０１７年９月第２６卷第ｌ７期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ，２０１７，Ｖｏ１．２６，Ｎｏ．１７ ・１５・ 消炎利喉口服液质量标准研究 吕 艳 李莉美 张１．云南省曲靖市第一人民医院，云南【摘＝瑶 袁建平 啦靖６５５０００ 曲靖６５５０００；２．云南健测检验检测技术有限公司，云南要】 目的：建立消炎利喉口服液的质量标准。方法：采用ＴＬＣ法定性鉴别玄参、金荞麦，ＨＰＬＣ法对黄芩苷含有 量进行测定。结果：玄参、金荞麦分离度良好，斑点清晰，阴性无干扰。黄芩苷在０．２０８—１．２４８Ｉ￣ｇ范围内线性关系良好（ｒ ０．９９９８），平均加样回收率为９９．４７％，ＲＳＤ为０．４３％。结论：该方法快速、准确、灵敏度高，可用于消炎利喉口服液质量 标准研究。 【关键词】 消炎利喉口服液；薄层色谱；高效液相色谱法；质量标准 【中图分类号】Ｒ２８４ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１００７—８５１７（２０１７）１７—００１５—０３ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｘｉａｏｙａｎ Ｌｉｈｏｕ Ｏｒａｌ Ｌｉｑｕｉｄ ＬＶ Ｙａｎ ＬＩ Ｌｉｍｅｉ ＺＨＡＮＧ Ｙａｏ ＹＵＡＮ Ｊｉａｎｐｉｎｇ １．Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ｐｅｏｐｌｅ￣Ｈｏｓｐｉｔｌａ ｏｆ Ｑｕｊｉｎｇ，Ｑｕｊｉｎｇ ６５５０００，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｙｕｎｎａｎ Ｊｉａｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ，Ｑｕｊｉｎｇ ６５５０００，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｘｉａｏｙａｎ Ｌｉｈｏｕ ｏｒａｌ ｌｉｑｕｉｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ＴＬＣ ｏｆｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｃｅａｅ ａｎｄ Ｆａｇｏ，ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｉｃａｌｉｎ ｃｏｎｔｅｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＴＬＣ ｏｆ Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｃｅａｅ ａｎｄ Ｆａｇｏ ｈａｄ ａ ｇｏｏｄ ｓｐｅｃｉｌｉａｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｗｈｅｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ．Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅｓ ｏｆ Ｂａｉｃａｌｉｎ ｗｅｒｅ ０．２０８～ １．２４８Ｉ￣ｇ（ｒ＝０．９９９８），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９９．４７％ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ ０．４３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｒａｐｉｄ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｘｉａｏｙａｎ Ｌｉｈｏｕ ｏｒａｌ ｌｉｑｕｉｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｘｉａｏｙａｎ Ｌｉｈｏｕ Ｏｒａｌ Ｌｉｑｕｉｄ；ＴＣＬ；ＨＰＬＣ；Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ 消炎利喉口服液是云南省曲靖市第一人民医院 院内自制纯中药制剂，处方源自我院名中医２０多年 品（批号：１１０７１５—２０１０１６）均购自中国药品生物制 品检定所。色谱纯乙腈、甲醇均购自美国Ｍｅｒｃｋ公 临床验方，主要由金荞麦、玄参、黄芩、忍冬藤、 臭灵丹等１０味中药组成，具有养阴、清咽、清热消 炎解毒的功效，主要用于急性扁桃体炎、咽峡炎， 上呼吸道感染引起的咽喉肿痛。其现行质量标准比 较简单，仅有金荞麦的薄层鉴别。为提升特色中药 制剂品牌，更全面、有效地控制该制剂的质量，提 升其质量标准，本实验在原有质量标准基础上，建 立了玄参、金养麦的ＴＬＣ定性鉴别方法，并采用 ＨＰＬＣ法测定消炎利喉口服液中黄芩苷的含量，以 期全面有效地控制消炎利喉口服液制剂的质量¨Ｊ。 １仪器与材料 司；其余化学试剂均为分析纯。 消炎利喉口服液（批号：２０１５１１２９、２０１６０１１７、 ２０１６０５１６）和阴性样品，均由曲靖市第一人民医院 制剂室提供。 ２方法与结果 ２．１薄层色谱鉴别 ２．１．１玄参鉴别 取本品１０ｍＬ，加乙酸乙酯振 摇提取２次，每次ｌＯｍＬ，弃取乙酸乙酯液，再用水 饱和的正丁醇振摇提取２次，每次１０ｍＬ，合并正丁 醇液，蒸干，残渣加甲醇ｌｍＬ使之溶解，作为供试 品溶液。同时制备不含玄参的阴性制剂，同法制成 阴性对照溶液。另取玄参对照药材１ ｇ，同法制备成 对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种 溶液２ ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以三氯 甲烷一甲醇（１３：２）为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以５％香草醛硫酸乙醇试液，加热至斑点显 １．１仪器１２６０型高效液相色谱仪（美捷伦 科技有限公司）；分析天平（梅特勒一托利多国际 股份有限公司）；Ｒ２００３ＫＥ旋转蒸发仪（上海申生 科技有限公司）；ＤＺＦ９２４０型干燥箱（上海一恒科 技有限公司）；ｐＨ计（梅特勒一托利多国际股份 有限公司）。 １．２材料玄参对照药材（批号：１２１００８—２０１００７）、 金荞麦对照药材（批号：１２１１１４—２０１４０３）、黄芩苷对照 色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点。如图１所示。 ２．１．２ 金荞麦鉴别 取本品１５ｍＬ，加甲醇 作者简介：吕艳（１９７７一），本科，主管药师，研究方向为中药制剂分析及质量标准研究。Ｅ—ｍａｉｌ：６７４３０５５２＠ｑｑ．ｃｏｎ －１６・ 中国民族民间医药２０１７年９月第２６卷第ｌ７期Ｃｈｉｎｅｓｃ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｎａｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ ＥｔｌｌｌｌｏｐｈａｍⅢｙ，２０１７，Ｖ０１．２６，Ｎｎ １７ ２０ｍＬ，放置１ｈ，加热回流１ｈ，放冷，滤过，滤液 以峰面积对黄芩苷的进样质量（ ｇ）绘制标准曲 线，线性回归方程为Ｙ＝３４７９Ｘ一３７．４６，ｒ＝ ０．９９９８。结果表明，在０．２０８～１．２４８ｌａｇ范围，峰 浓缩至５ｍＬ，作为供试品溶液。同时制备不含金荞 麦的阴性制剂，同法制成阴性对照溶液。另取金 荞麦对照药材１ｇ，同法制成对照药材溶液。再取 表儿茶素对照品，加甲醇制成每１ｍＬ含１ｍｇ的溶 面积与黄芩苷进样质量呈良好的线性关系。 ２．２．４精密度试验在“２．２．２”项色谱条件下， 精密吸取对照品溶液５ Ｌ，连续进样６次，测定峰 面积，ＲＳＤ为０．０８％，表明进样精密度良好。 ２．２．５重复性试验取同一批样品，按“２．２．１．２” 液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取 供试品溶液５一ｌ０ Ｌ、对照药材溶液和对照品溶液 各５ Ｌ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以甲苯 乙酸乙酯一甲醇一甲酸（１：２：０．２：０．１）为展开 一项下方法制备６份供试品溶液，在“２．１．１”项色谱 条件下测定峰面积，峰面积ＲＳＤ为１．２％，结果表 明重复性良好。 ２．２．６稳定性试验 取同一批供试品溶液，在 剂，展开，取出，晾干，喷以２５％磷钼酸乙醇溶 液，在１ １０￣Ｃ加热至斑点显色清晰。供试品色谱 中，在与对照药材色谱色谱和对照品相应的位置 上，显相同颜色的斑点。如图２所示。 “２．２．１．２”项色谱条件下０、２、４、８、１６、２４进 样，测定峰面积，峰面积ＲＳＤ为２．３％，结果表明 在２４ｈ内供试品溶液稳定性良好。 ２．２．７专属性试验将黄芩苷对照品、供试品溶液 和阴性样品溶液按“２．２．２”项下条件下分别进样， 记录色谱图，黄芩苷的保留时间为８．６５ｍｉｎ左右， 高效液相色谱图显示在黄芩苷峰位处，阴性样品中 无杂质干扰，方法专属Ｉ生良好。如图３所示。 １ ２ ３ ４ ５ １ ２ ３ ４ ５ 一一ｚ・玄参； 朋性样品； ．样品 篙 毒 ；‘豪 ； 图１ 玄参薄层色谱鉴别 图２金荞麦薄层色谱鉴别 ｔ／ｍｉｎ ２．２黄芩苷的含量测定 ２．２．１溶液的制备 Ａ、对照品溶液 ２．２．１．１ 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适 量，精密称定，加甲醇制成每１ ｍＬ含４０ｌｘｇ的溶 液，即得。 ２．２．１．２ 供试品溶液的制备 精密量取本品 ０．２ｍＬ，置ｌＯｍＬ量瓶中，加甲醇３５ｍＬ，超声处理 （功率ｌ３５Ｗ，频率５９ｋＨｚ）２０ｒａｉｎ，取出，放冷， 加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 ｔ／ｍｉｎ ２．２．１．３ 阴性样品溶液的制备按照工艺制备消炎 Ｂ、阴性样品溶液 利喉口服液阴性样品（缺黄芩），按照“２．２．１．２” 项下配制阴性样品溶液。 ２．２．２色谱条件及系统适应性试验色谱柱：Ｚｏｒｂ— ａｘ Ｃ１８（４．６ｒａｍ ｘ １５０ｒａｍ，５ｔｘｍ）；流动相：甲醇一 水一磷酸（４７：５３：０．２）；柱温：３０℃；检测波长： ２８０ｎｍ；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；进样量：１０１ｘＬ。 ２．２．３线性关系考察 精密量取浓度为２６０１ａ，ｇ／ ｍＬ的黄芩苷对照品溶液适量，加甲醇制成浓度分 别为２０．８、４１．６、６２．４、８３．２、１０４．０、１２４．８ ｇ／ ｍＬ的对照品溶液，分别进样１ＯＩｘＬ，记录色谱图， ｔ／ｍｉｎ ｃ、供试品溶液 １黄芩背 图３ ＨＰＬＣ色谱图 中国民族民间医药２０１７年９月第２６卷第１７期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ，２０１７，￣ｏ１．２６，Ｎｏ．１７ ・１７・ ２．２．８加样回收率试验精密量取０．１ｍＬ消炎利 喉口服液样品（２０１６０５１６，浓度２．６７４ ｍｇ／ｍＬ）９ 份置于ｌＯｍＬ容量瓶中，作为低、中、高水平组分 别加入浓度为９６．７８ｔｘｇ／ｍＬ的黄芩苷对照品２．０、 下操作，依次定容、摇匀、滤过，进样测试，记 录色谱图，计算黄芩苷各浓度水平的加样回收率。 结果表明，平均加样回收率为９９．４７％，ＲＳＤ为 ０．４３％，加样回收率符合要求。见表１。 ３．０、４．ＯｍＬ，每个浓度３份，按照“２．２．１．２”项 表１加样回收率试验结果 （ｎ＝９） ２．２．３样品测定按照上述验证的方法，取不同批 要意义。 参考文献 次的消炎利喉口服液测定黄芩苷的含量，３批样品中 黄芩苷的含量分别为２．６７７、２．６６３、２．６７４ｍｇ／ｍＬ。按 照３批样品计算，以均值的８０％作为含量下限，每 ｌｍＬ消炎利喉口服液中含黄芩苷不少于２．１４ｍｇ。 ３讨论 ［１］周跃华．中药新药质量标准研究中常见问题浅析 ［Ｊ］．中成药，２００４，２６（１１）：９７２—９７５． ［２］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｍ］． 北京：中国医药科技出版社，２０１５． ［３］贺云杰，赵晨，李妍，等．参附强心丸中人参、大 黄、桑白皮的薄层色谱鉴别及乌头碱限度检查［Ｊ］． 世界科学技术一中医药现代化，２００９，１１（３）：４６８ —３．１玄参和金荞麦ＴＬＣ法鉴别消炎利喉口服 液的质量标准提升是在原有质量标准基础上，根 据本院的配制的实际情况而形成的。在制定玄参 和金荞麦ＴＬＣ方法时，发现由于本品为水煎煮 液，成分复杂，通过文献查阅Ｌ６－９ ３并结合２０１５版 《中国药典》，选择合适的提取方法及展开剂，得 到的色谱斑点清晰，阴性对照无干扰，方法专属 性较强。 ３．２增加黄芩苷含量测定的意义依据《中国药 典》２０１５版要求，对中药制剂需进行定量分析， 从院内制剂研究开发及发展的角度，须提升院内 制剂的质量标准 。研究针对处方中另一味臣药 黄芩建立其指标性成分黄芩苷的含量测定方法， 并进行了方法学验证。实验采用所建立的方法， 对３个不同批次消炎利喉口服液中黄芩苷的含量进 行钡４定，发现各批次差异不明显，表明该工艺比 较稳定，质量控制方法可行。 研究为消炎利喉口服液建立了有效成分含量 测定方法，并且增加了玄参的薄层色谱鉴别，进 步完善其质量标准，这对指导该制剂今后的生 产、质量控制以及产品质量的稳定性提高具有重 一４７１． ［４］仕海涛．扶正化积合剂质量标准研究［Ｊ］．中国医药 导报，２０１５，１２（６）：９１—９５． ［５］魏良兵，吴溪，杜红芳，等．枳壳健胃颗粒的质量控 制研究［Ｊ］．中国中医药信息杂志，２０１３，２０（１）： ５４—５６． ［６］李树梅，李应超，张发明，等．乌梅酸枣仁口服液的 质量标准研究［Ｊ］．时珍国医国药，２０１０，２１（１２）： ３１０１—３１０４． ［７］李军．气管炎合剂质量标准研究［Ｊ］．辽宁中医药大 学学报，２０１５，１７（３）：４３—４５． ［８］吴承云，郑清明，周亚莉，等．试论中药制剂规格标示 的合理性及规范性［Ｊ］．中国药事，２０１２，２６（１）：４７ —４９． ［９］王佳波，左志如．妇科止带片药品质量标准提高研究 ［Ｊ］．黑龙江医药，２００９，２２（４）：４６４—４６６． ［１Ｏ］李哲，常暖，李黎．中药院内制剂历史、现状 及对策［Ｊ］．中国中医药图书情报杂志，２０１４，３８ （１）：３８—４１． （收稿日期：２０１７—０７—３１编辑：陶希睿）
