MM_FS_CNJ_0033 出口粮谷中路咪啉残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0033出口 粮谷 路咪啉 残留量 气相色谱法 外标法定量

MM_FS_CNJ_0033

      出口粮谷中路咪啉残留量检验方法

1.适用范围

    本方法适用于出口糙米中路咪啉残留量的检验。

2.原理概要

    糙米中残留的路咪啉用丙酮-水提取，提取液中色素和脂肪用氯化铵-磷酸溶液沉淀除去。提取液在经液液分配和弗罗里硅土柱净化后，用配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，。如有必要可用气相色谱-质谱法确证。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

    丙酮：重蒸馏；

    硅藻土：实验试剂，100～200目。650℃灼烧4h，冷却后存放于干燥器中备用；

    无水硫酸钠：650℃灼烧4h，冷却后贮于密封容器中备用；

    正己烷：重蒸馏；

    凝聚液：取2g氯化铵及4mL磷酸(ρ约1.7g/mL)，加水为400mL；

    乙醚：重蒸馏；

    弗罗里硅土：层析用，60～100目，650℃灼烧4h，冷却后储于密闭容器中，使用前于130℃下活化3h。存放干燥器中冷却后备用；

    路咪啉标准品：纯度≥98%；

    路咪啉标准溶液：准确称取适量的路咪啉标准品，用正己烷配成浓度为20μg/mL的标准储备液，根据需要再配制成适当浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器

    气相色谱仪并配有电子俘获检测器。或配有质谱检测器；

    弗罗里硅土净化柱：30cm×1.5cm(内径)玻璃柱，装入弗罗里硅土5g，上端装入5g无水硫酸钠。使用前需用标准溶液对其进行校准；

    旋转蒸发器；

    微量注射器：10μL；

    布氏漏斗；

    植物粉碎器。

4.试样的抽取与制备

4.1.检验批

    以不超过4000袋(200t)为一检验批。

    同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

    按式(1)计算抽样袋数：

a＝……………………………(1)

式中：N——全批袋数；

     a——抽样袋数。

注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。

4.3.抽样工具

4.3.1.金属单管取样器：全长55cm(包括手柄)，直径1.5～2.0cm，沟槽长度应超过袋对角线长度的一半；

    取样铲；

    分样板；

    盛样器：筒或袋，可密封；

    分样布或适用铺垫物。

4.4.抽样方法

4.4.1.倒包抽样：从堆垛的各部位随机抽取规定的应抽件数的10%(每批一般不少于3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双于紧握袋底两角，提起约成45°倾角，倒拖约1m，使袋内货物全部倒出。查看袋内和袋间品质是否均匀。确认情况正常后，用取样铲随机在各个部位抽取样品，并立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的量应基本一致。

4.4.2.袋内抽样：按规定的应抽样件(扣除倒包抽样件数)，在堆垛四周上、中、下各层以曲线形走向随机抽取。将取样器管槽朝下，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后将管槽旋转朝上，抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的量应与4.4.1基本上一致。

    每批所抽取的样品总量应不少于4kg。

4.4.3.大样缩分：合并袋内和倒包抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分出样品不少于2kg，盛于样品筒内，加封后标明标记，并及时送交实验室。

4.5.试样制备

4.5.1.制样工具

    磨碎机。

    筛子：20目筛。

    分样板。

    盛样瓶：具塞广口瓶。

4.5.2.制样方法

    将样品按四分法缩分至1kg，全部磨碎并通过20目筛，混匀，均分成两份，作为试样，分装入洁净的容器内，密封，标明标记。

4.6.试样保存

    将试样于－5℃以下避光保存。

注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述

5.测定步骤

5.1.提取

    称取试样约5g(精确到0.01g)置于250mL锥形瓶中，加入60mL丙酮及20mL水，搅拌5min，用上铺1cm厚硅藻土的布氏漏斗抽滤于抽滤瓶中。收取残渣于锥形瓶中，加入60mL丙酮，振摇均匀，同上操作。滤液合并于梨形圆底烧瓶中，在旋转蒸发器上于40℃水浴中浓缩至约20mL。

    将此液移入300mL分液漏斗中，加入100mL 5%氯化钠溶液和100mL正己烷，剧烈振荡5min，静置，分出正己烷。在水层中加入50mL正己烷，同上操作，合并正己烷提取液于300mL锥形瓶中。加入适量的无水硫酸钠，放置1h并不时振摇。过滤于梨形烧瓶中。然后用20mL正己烷洗涤锥形瓶和滤纸上的残渣，过滤，重复操作两次。合并滤液和洗液，在旋转蒸发器上40℃水浴中浓缩至近干。

    残留物中加入50mL丙酮使溶解，加入50mL凝聚液及2g硅藻土，轻轻摇匀，放置5min。用上铺1cm厚硅藻土的布氏漏斗抽滤。用50mL丙酮-凝聚液(1＋1)洗涤上述梨形烧瓶及滤垫，抽滤。合并滤液及洗液于300mL分液漏斗。在分液漏斗中加入5g氯化钠及50mL正己烷，剧烈振荡5min，静置，分出正己烷。于水层中加入50mL正己烷，同上操作。提取液合并于300mL锥形瓶中。加入适量的无水硫酸钠，放置30min并不时振摇，过滤于梨形烧瓶中。用20mL正己烷洗涤锥形瓶及滤纸上的残渣，过滤。合并滤液和洗液，于40℃水浴中除去正己烷。于残留物中加入乙醚-正己烷(1＋19)10mL溶解。

5.2.净化

    在弗罗里硅土柱中注入5.1所得溶液后，注入50mL乙醚-正乙烷(1＋19)混合液，弃去流出液。然后注入100mL乙醚-正己烷(3＋7)混合液，收集流出液于梨形烧瓶中，在旋转蒸发器上于40℃水浴中浓缩至干。用500mL正己烷溶解残留物，供气相色谱测定用。

5.3.测定

5.3.1.气相色谱条件

色谱柱：农残-Ⅱ，25m×0.53mm(id)，膜厚为0.5μm；

载气：氮气，纯度≥99.99%，5mL/min；

尾吹气：氮气，纯度≥99.99%，30mL/min；

进样品温度：300℃；

色谱柱温度：260℃；

检测器温度：300℃；

进样方式：无分流，直接进样方式。

5.3.2.气相色谱测定

根据试样中被测农药含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和待测样液中农药的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作液与样液等体积参插进样测定，在上述色谱条件下，路咪啉保留时间约为7.2min。

5.4.气相色谱-质谱确证试验

5.4.1.气相色谱-质谱条件

色谱柱：DB-17，30m×0.25mm(id)，膜厚为0.25μm；

载气：氮气，纯度≥99.99%，0.9mL/min；

色谱柱温度：恒温260℃，保持45min；

进样口温度：270℃；

色谱-质谱接口温度：270℃；

进样量：2μL；

进样方式：无分流，2min后开阀；

电离方式：EI；

电子倍增器电压：1.35kV；

测定方式：离子监测方式；

监测离子(m/z)：253、181、174；

溶剂延迟：8min。

5.4.2.质谱确证

    对标准溶液及样液均按5.4.1规定的条件进行测定。如果样液中与标准溶液中在相同的保留时间有峰出现，必要时，用质谱法对其进行确证。

5.5.空白试验

    除不加试样外，均按上述测定步骤进行。

6.结果计算

用色谱数据处理机或按式(2)计算试样中路咪啉的残留含量：

式中：X——试样中路咪啉含量，mg/kg；

h——样液中路咪啉的色谱峰高，mm；

h_s——标准工作液中路咪啉的色谱峰高，mm；

c——标准工作液中路咪啉的浓度，μg/mL；

V——样液中最终定容体积，mL；

m——最终样液所代表的试样量，g。

注：计算结果需将空白值扣除。

7.低限、回收率的测定

7.1.测定低限

    本方法测定低限为0.02mg/kg。

7.2.回收率

    回收率的试验数据：

路咪啉的添加浓度在0.02mg/kg时，回收率为84.3%；

路咪啉的添加浓度在0.05mg/kg时，回收率为88.7%；

路咪啉的添加浓度在0.20mg/kg时，回收率为95.9%。

8.来源：

    SN  0603—1996